瑞特氏染色： 1.  染色液配置 称取瑞特氏染料0.1克溶于60 ml 甲醇中，过滤。贮褐色瓶中备用。（配置时，要先将瑞特氏染料置研钵体内边研边滴加甲醇，使染料溶液得更好。） 2.  瑞特氏染色法： 取小鼠骨动脉血，涂制玻片。干后用玻璃笔在涂处之两侧划线（限制染液流掉）。于划线内部滴加染液3~4滴，经3~5分钟后，再滴加等量的蒸馏水，轻轻晃动混合。经5分钟后，用蒸馏水洗...

1.  将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中，置于15 ml 的玻璃试管中，温和振摇。 2.  加10 μmol 的合成肽。 3.  缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液，于室温下振摇。 4.  使其反应2 h（溶液将变成黄色）。 5.  加0.25 ml 的1 mol/l 甘氨酸以封闭未反应的戊二醛，使其反应30 min。 ...

1.  将10 mg BSA溶于0.5 ml 0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液中，置于一个2 ml 的玻璃试管，加50 μl MBS/DMF溶液，于室温下温和搅拌30 min。 2.  加样到PD-10柱子上，上柱前用10 ml 的0.1 mol/l pH6.8的磷酸钠缓冲液预平衡柱子。 3.  上样后每0.6 ml 加I为一组分分部收集洗脱液，监测A 280 ...

1.  准备好一根DEAE-Affi-Gel Blue柱子。用5倍柱床体积的加样缓冲液平衡（7 ml 柱床体积/ml 抗血清或腹水）。此步骤及以下各步均在4℃下操作实施。 2.  于4℃下透析样品40 h，中间换2次加样缓冲液（每次换大约4 L）加样上柱，速度为10 ml/h。用3倍柱床体积的加样缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱未结合的蛋白质。 3.  用洗脱缓冲液以10 ml/h 的速度洗脱结合的IgG组分，...

1.  于4℃不断搅拌下，往2体积的含有IgG的混合物中，逐滴加入1体枳pH7.0的SAS溶液。加完后置于4℃不间断地搅拌此混合物2~4 h以形成沉淀。2 000 g 离心20 min。 2.  用预冷的33% SAS溶液在漩涡混合器上振荡洗涤沉淀，所用溶液的体积与原含IgG的混合物等体积。 3.  在旋涡混合器上温和振荡以将沉淀溶于合适的预冷的缓冲液中（5%~10%的原始体积）。4℃透析IgG溶液48 h以上，期间...

1.  准备用于放血的家兔（见基本方案） 2.  将靠近家兔头部的半只耳朵托在梅指和食指上，用中指和无名指弯曲剩余的半只耳朵使之下垂，以便使血液随重力下流，用一个18G注射用针头（不带注射器）沿着兔耳中动脉进针，针尖指向兔耳根部。 3.  进针后，将注射用针头推进5~10 min，小心勿伤及动脉血管壁，用一支50 ml 的塑料离心管收集兔血（见基本方案），之后出针止血，并包扎兔耳。 ...

1.  准备用于注射家兔的抗原，并准备用于皮下注射免疫的家兔（方法同皮内注射）。 2.  将家兔背部皮肤捏出，以远离其下的肌肉，用24G注射针头全程穿剌，进入皮下，小心勿刺入肌肉组织中，在4个不同的部位各注射0.5 ml 抗原。 3.  用不完全弗氏佐剂进行家兔肌肉内法射以加强免疫（见基本方案）或者采用皮下组织注射，方法同上。 ...

1.  按基本方案中步骤1制备免疫兔用的抗原。 2.  牢牢地抓住兔子，剃除其背毛，用70%乙酵消毒其暴露的皮肤。用拇指和食指将需要免疫注射的区域的皮肤张开，用3 ml 注射器带24G注射针头以相对皮肤30 。 的角度进针（针尖的斜面朝上），进针深度只达外皮层之下。放低注射器，使之平放在兔的背部上，将≤100 μl 的乳化抗原注射进真皮层间，与前操作相同，分别在兔的背部选择其他4个部位，并注射不大于...

此法是一种用以产生高放射比活、放射标记均匀分布的04八片段的切口平移方法。 1.  用合适的限制性内切酶消化DNA，DNA片段经电泳纯化或乙醇沉淀，用TE缓冲液重悬。 2.  在冰浴中混合下列物质： （1）2.5 μl 0.5mmol/l  3dNTP混合液 （2）2.5 μl  10×klenow酶缓冲液 （3）5 μl  3000Ci/mmol...

1.  取2 ml 的弗氏完全佐剂加到2 ml 的溶于PBS的纯化抗原中，使之乳化。用3 ml 注射器抽取此乳化液，接上22G注射针头，排出注射器中的气泡。 2.  将兔子敢在固定架上，用一只手抓住兔的颈背部毛皮，另一只手托住兔的后腿及臀部，将兔束紧固定以使后肢不能伸张，用70%乙醇对所要注射的区域进行清洁消毒，在后肢大腿肌肉内进针约1 cm 深，毎条大腿肌肉内最多注射0.5 ml 乳化液。 3.  四周后，用1 ...