我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- DBH-FLPo
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 7385 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- p15A ori
- 载体来源:
- Sun JJ, Ray R.
- 启动子:
- mPGK
DBH-FLPo 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
DBH-FLPo 载体序列
LOCUS 40924_570 7385 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector DBH-FLPo, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 7385)
AUTHORS Sun JJ, Ray R.
TITLE Generation of Two Noradrenergic-Specific
Dopamine-Beta-Hydroxylase-FLPo Knock-In Mice Using
CRISPR/Cas9-Mediated Targeting in Embryonic Stem Cells
JOURNAL PLoS ONE 11 (7), E0159474 (2016)
PUBMED 27441631
REFERENCE 2 (bases 1 to 7385)
AUTHORS Sun JJ, Ray R.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (27-APR-2016) Neuroscience, Baylor College of Medicine,
One Baylor Plaza Room T707, Houston, TX 77030, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 7385)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 7385)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "PLoS ONE";
date: "2016"; volume: "11"; issue: "7"; pages: "E0159474"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(27-APR-2016) Neuroscience, Baylor College of Medicine, One Baylor
Plaza Room T707, Houston, TX 77030, USA"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7385
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
rep_origin 18..562
/label=p15A ori
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
misc_feature 842..1838
/label=5' homology arm
/note="5' homology arm"
CDS 1842..3137
/label=FLPo
/note="nuclear-targeted site-specific recombinase"
polyA_signal 3171..3395
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
protein_bind 3403..3436
/label=lox2272
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (AAGTATCC) (Shaw et al., 2021). lox2272 sites are
compatible with each other, but incompatible with loxP or
loxN sites (Lee and Saito, 1988)."
promoter 3443..3942
/label=PGK promoter
/note="mouse phosphoglycerate kinase 1 promoter"
promoter 3954..4001
/label=EM7 promoter
/note="synthetic bacterial promoter"
CDS 4020..4820
/label=NeoR/KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase from Tn5"
regulatory 4837..5139
/label=bghpA
/note="bghpA"
/regulatory_class="other"
polyA_signal 4861..5085
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
misc_feature 5140..5173
/label=Lox2722
/note="Lox2722"
protein_bind complement(5140..5173)
/label=lox2272
/bound_moiety="Cre recombinase"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (GGATACTT). lox2272 sites are compatible with each
other, but incompatible with loxP or loxN sites."
misc_feature 5198..6197
/label=3' homology arm with deletion
/note="3' homology arm with deletion"
promoter 6273..6377
/label=AmpR promoter
CDS 6378..7235
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"