我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pFB-LIC-Bse
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6816 bp
- 载体类型:
- Structural Genomics Vectors
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Savitsky P, Bray J, Cooper CD, Marsden BD, Mahajan P, Burgess-Brown
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- sacB
pFB-LIC-Bse 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pFB-LIC-Bse 载体序列
LOCUS pFB-LIC-Bse. 6816 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION Baculovirus vector encoding an N-terminal 6xHis-TEV cassette and
ampicillin resistance plus a SacB negative selection marker, for
purification of recombinant proteins.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS pFB-LIC-Bse
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6816)
AUTHORS Savitsky P, Bray J, Cooper CD, Marsden BD, Mahajan P, Burgess-Brown
NA, Gileadi O.
TITLE High-throughput production of human proteins for crystallization:
the SGC experience.
JOURNAL J. Struct. Biol. 2010;172:3-13.
PUBMED 20541610
REFERENCE 2 (bases 1 to 6816)
AUTHORS Structural Genomics Consortium
TITLE Direct Submission
REFERENCE 3 (bases 1 to 6816)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "J. Struct.
Biol."; date: "2010"; volume: "172"; pages: "3-13"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
COMMENT For ligation-independent cloning (LIC), linearize with BseRI to
remove the SacB cassette, and treat with T4 DNA polymerase plus
dGTP.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6816
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter 1..92
/label=polyhedrin promoter
/note="promoter for the baculovirus polyhedrin gene"
CDS 148..150
/codon_start=1
/product="start codon"
/label=start codon
/note="ATG"
/translation="M"
CDS 154..171
/label=6xHis
/note="6xHis affinity tag"
CDS 196..216
/label=TEV site
/note="tobacco etch virus (TEV) protease recognition and
cleavage site"
protein_bind complement(246..279)
/label=loxP
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (ATGTATGC) (Shaw et al., 2021)."
promoter 294..739
/label=sacB promoter
/note="sacB promoter and control region"
CDS 740..2158
/label=SacB
/note="secreted levansucrase that renders bacterial growth
sensitive to sucrose"
polyA_signal 2403..2537
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
mobile_element complement(2566..2731)
/label=Tn7L
/note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)"
rep_origin 2915..3370
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 3397..3501
/label=AmpR promoter
CDS 3502..4359
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
rep_origin 4533..5121
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
mobile_element complement(5424..5648)
/label=Tn7R
/note="mini-Tn7 element (right end of the Tn7 transposon)"
CDS complement(5718..6248)
/label=GmR
/note="gentamycin acetyltransferase"
promoter complement(6437..6465)
/label=Pc promoter
/note="class 1 integron promoter"