我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pFastBac Dual
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 5237 bp
- 载体类型:
- Insect Cell Vectors
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Invitrogen (Life Technologies)
- 拷贝数:
- High copy number
- 启动子:
- p10
pFastBac Dual 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pFastBac Dual 载体序列
LOCUS Exported 5237 bp DNA circular SYN 10-SEP-2025 DEFINITION synthetic circular DNA ACCESSION . VERSION . KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct REFERENCE 1 (bases 1 to 5237) AUTHORS 11111111 TITLE Direct Submission FEATURES Location/Qualifiers source 1..5237 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" mobile_element 83..248 /mobile_element_type="transposon:Tn7" /label=Tn7L /note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)" polyA_signal 277..411 /label=SV40 poly(A) signal /note="SV40 polyadenylation signal" promoter complement(670..761) /gene="polh from Autographa californica" /label=polyhedrin promoter /note="promoter for the baculovirus polyhedrin gene" promoter 785..894 /label=p10 promoter /note="baculovirus promoter for expression in insect cells" polyA_signal 1030..1078 /label=HSV TK poly(A) signal /note="herpesvirus thymidine kinase polyadenylation signal" promoter 1586..1614 /gene="intI1 (promoter lies within the coding sequence)" /label=Pc promoter /note="class 1 integron promoter" CDS 1803..2336 /codon_start=1 /gene="aacC1" /product="gentamycin acetyltransferase" /label=GmR /note="confers resistance to gentamycin" /translation="MLRSSNDVTQQGSRPKTKLGGSSMGIIRTCRLGPDQVKSMRAALD LFGREFGDVATYSQHQPDSDYLGNLLRSKTFIALAAFDQEAVVGALAAYVLPKFEQPRS EIYIYDLAVSGEHRRQGIATALINLLKHEANALGAYVIYVQADYGDDPAVALYTKLGIR EEVMHFDIDPSTAT" mobile_element 2403..2627 /mobile_element_type="transposon:Tn7" /label=Tn7R /note="mini-Tn7 element (right end of the Tn7 transposon)" rep_origin complement(2932..3520) /direction=LEFT /label=ori /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(3691..4551) /codon_start=1 /gene="bla" /product="beta-lactamase" /label=AmpR /note="confers resistance to ampicillin, carbenicillin, and related antibiotics" /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS LIKHW" promoter complement(4552..4656) /gene="bla" /label=AmpR promoter rep_origin complement(4682..5136) /direction=LEFT /label=f1 ori /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow indicates direction of (+) strand synthesis"