质粒编号
质粒名称
规格
价格
V014951
pLV-7×SMAD-Fluc-Puro
5 μg (冻干粉)
我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pLV-7×SMAD-Fluc-Puro
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 8143 bp
- 复制子:
- ori
pLV-7×SMAD-Fluc-Puro 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pLV-7×SMAD-Fluc-Puro 载体序列
LOCUS Exported 8143 bp DNA circular SYN 14-JUN-2024
DEFINITION Exported.
ACCESSION V014951
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 8143)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 2 (bases 1 to 8143)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..8143
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
LTR 117..750
/label=3' LTR
/note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
misc_feature 797..922
/label=HIV-1 Psi
/note="packaging signal of human immunodeficiency virus
type 1"
misc_feature 1415..1648
/label=RRE
/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
CDS 1833..1877
/label=gp41 peptide
/note="antigenic peptide corresponding to amino acids 655
to 669 of the HIV envelope protein gp41 (Lutje Hulsik et
al., 2013)"
CDS 2026..2067
/label=Protein Tat
/note="Protein Tat from Human immunodeficiency virus type 1
group M subtype B (isolate WMJ22). Accession#: P12509"
misc_feature 2164..2281
/label=cPPT/CTS
/note="central polypurine tract and central termination
sequence of HIV-1"
protein_bind join(2297..2304,2309..2316,2327..2334,2341..2348,2356..2363,
2371..2378,2385..2392)
/label=7xSMAD
/bound_moiety="SMAD binding motif 7 copies"
promoter 2445..2476
/label=minP
/note="minimal TATA-box promoter with low basal activity"
CDS 2555..4204
/label=luciferase
/note="firefly luciferase"
misc_feature 4259..4845
/label=IRES2
/note="internal ribosome entry site (IRES) of the
encephalomyocarditis virus (EMCV)"
CDS 4865..5461
/label=PuroR
/note="puromycin N-acetyltransferase"
LTR 5667..5900
/label=3' LTR (Delta-U3)
/note="self-inactivating 3' long terminal repeat (LTR) from
HIV-1"
polyA_signal 6057..6281
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
promoter 6377..6481
/label=AmpR promoter
CDS 6482..7339
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
rep_origin 7513..8101
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"