我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pmET32c
- 载体抗性:
- Gentamycin
- 载体长度:
- 7425 bp
- 载体类型:
- Expression vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Soleymani S, Kalidari GA, Bassami MR, Dehghani H
pmET32c 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pmET32c 载体序列
LOCUS V015414 7425 bp DNA circular SYN 01-AUG-2019
DEFINITION Exported.
ACCESSION V015414
VERSION V015414
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 7425)
AUTHORS Soleymani S, Kalidari GA, Bassami MR, Dehghani H, Hashemi Tabar GR.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (10-JUN-2019) Pathobiology, Division of Biotechnology,
Faculty of Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad,
Azadi Square, Mashhad, Razavi Khorasan 9177948974, Iran
REFERENCE 2 (bases 1 to 7425)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(10-JUN-2019) Pathobiology, Division of Biotechnology, Faculty of
Veterinary Medicine, Ferdowsi University of Mashhad, Azadi Square,
Mashhad, Razavi Khorasan 9177948974, Iran"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..7425
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
protein_bind 254..275
/label="CAP binding site"
/note="CAP binding activates transcription in the presence
of cAMP."
CDS 1050..1238
/label="rop"
/note="Rop protein, which maintains plasmids at low copy
number"
misc_feature 1343..1485
/label="bom"
/note="basis of mobility region from pBR322"
rep_origin complement(1671..2259)
/direction=LEFT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
promoter 2347..2375
/label="Pc promoter"
/note="class 1 integron promoter"
CDS 2564..3094
/label="GmR"
/note="gentamycin acetyltransferase"
promoter 3387..3464
/label="lacI promoter"
CDS 3465..4544
/label="lacI"
/note="lac repressor"
promoter 4698..4726
/label="tac promoter"
/note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and
lac UV5 promoters"
protein_bind 4727..4751
/label="lac operator"
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
RBS 4773..4795
/label="RBS"
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 4818..5141
/label="TrxA"
/note="E. coli thioredoxin"
CDS 5166..5612
/label="MNase"
/note="micrococcal nuclease from Staphylococcus aureus"
CDS 5613..5630
/label="6xHis"
/note="6xHis affinity tag"
regulatory 5690..5847
/label="rrnB terminator"
/note="rrnB terminator"
/regulatory_class="terminator"
terminator complement(6180..6227)
/label="T7 terminator"
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
CDS complement(6294..6311)
/label="6xHis"
/note="6xHis affinity tag"
CDS complement(6324..7034)
/label="lambda repressor (ts)"
/note="temperature-sensitive variant of the phage lambda
repressor"
regulatory 7082..7109
/label="lambda PR"
/note="lambda PR"
/regulatory_class="promoter"
CDS 7138..7410
/gene="E"
/label="Lysis protein E"
/note="Lysis protein E from Enterobacteria phage phiX174.
Accession#: P03639"