我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pTrcHisA-GFP(teLAA)-(teF)MCP
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 5958 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Gao C.
pTrcHisA-GFP(teLAA)-(teF)MCP 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pTrcHisA-GFP(teLAA)-(teF)MCP 载体序列
LOCUS 62056_21385 5958 bp DNA circular SYN 25-MAR-2019
DEFINITION Cloning vector pTrcHisA-GFP(teLAA)-(teF)MCP, complete sequence.
ACCESSION MK258730
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5958)
AUTHORS Gao C.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (05-DEC-2018) State Key Laboratory of Food Science and
Technology, Jiangnan University, 1800 Lihu Road, Wu Xi, Jiang Su
214122, China
REFERENCE 2 (bases 1 to 5958)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(05-DEC-2018) State Key Laboratory of Food Science and Technology,
Jiangnan University, 1800 Lihu Road, Wu Xi, Jiang Su 214122, China"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5958
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter 193..222
/label=trc promoter
/note="strong E. coli promoter; hybrid between the trp and
lac UV5 promoters"
protein_bind 230..246
/label=lac operator
/note="The lac repressor binds to the lac operator to
inhibit transcription in E. coli. This inhibition can be
relieved by adding lactose or
isopropyl-beta-D-thiogalactopyranoside (IPTG)."
misc_feature 263..332
/label=rrnG antiterminator
/note="antiterminator from the E. coli rrnG leader region
(Berg et al., 1989)"
CDS 383..406
/label=minicistron
/note="synthetic cistron containing a ribosome binding site
(Shine-Dalgarno sequence), for enhancing the bacterial
expression of a downstream cistron (Schoner, 1997)"
CDS 425..442
/label=6xHis
/note="6xHis affinity tag"
CDS 482..505
/label=Xpress(TM) tag
/note="Xpress(TM) epitope tag, including an enterokinase
recognition and cleavage site"
CDS 521..1237
/label=EGFP
/note="enhanced GFP"
CDS 1244..1264
/label=TEV site
/note="tobacco etch virus (TEV) protease recognition and
cleavage site"
misc_feature 1268..1300
/label=ssrA tag
/note="ssrA tag"
regulatory 1310..1321
/label=b0034 RBS
/note="b0034 RBS"
/regulatory_class="ribosome_binding_site"
misc_feature 1337..1354
/label=TEVp cleave site
/note="TEVp cleave site"
misc_feature 1355..1369
/label=F degron
/note="F degron"
CDS 1388..2080
/label=mKate2
/note="monomeric far-red fluorescent protein (Shcherbo et
al., 2009)"
terminator 2311..2397
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 2489..2516
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 2536..2627
/label=AmpR promoter
CDS 2628..3485
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
rep_origin 3659..4247
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature complement(4433..4573)
/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
promoter 4759..4836
/label=lacI promoter
CDS 4837..5916
/label=lacI
/note="lac repressor"