我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pG20_FLAG_Blp
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 5071 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- pSa ori
- 宿主:
- Plants
- 载体来源:
- Pratt AI, Knoblauch J, Kunz H-H.
- 启动子:
- CaMV 35S
pG20_FLAG_Blp 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pG20_FLAG_Blp 载体序列
LOCUS 62056_11130 5071 bp DNA circular SYN 03-NOV-2020
DEFINITION Cloning vector pG20_FLAG_Blp, complete sequence.
ACCESSION MT896415
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5071)
AUTHORS Pratt AI, Knoblauch J, Kunz H-H.
TITLE An updated pGREEN-based vector suite for cost-effective cloning in
plant molecular biology
JOURNAL MicroPubl Biol (2020)
REFERENCE 2 (bases 1 to 5071)
AUTHORS Pratt AI, Kunz H-H.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (17-AUG-2020) School of Biological Sciences, Washington
State University, 1150 NE College Ave #385, Pullman, WA 99163, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 5071)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "MicroPubl
Biol (2020)"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(17-AUG-2020) School of Biological Sciences, Washington State
University, 1150 NE College Ave #385, Pullman, WA 99163, USA"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5071
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter 30..375
/label=CaMV 35S promoter
/note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
virus"
CDS 395..943
/label=BlpR
/note="phosphinothricin acetyltransferase"
polyA_signal 1178..1354
/label=CaMV poly(A) signal
/note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
misc_feature complement(1362..1384)
/label=LB T-DNA repeat
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA
(truncated)"
rep_origin complement(1511..1946)
/direction=LEFT
/label=pSa ori
/note="origin of replication from bacterial plasmid pSa"
CDS 2237..3049
/label=KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
rep_origin 3223..3811
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature complement(3902..3926)
/label=RB T-DNA repeat
/note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
terminator complement(4091..4339)
/label=HSP terminator
/note="efficient transcription terminator from the
Arabidopsis thaliana heat shock protein 18.2 gene (Nagaya
et al., 2010)"
CDS complement(4350..4373)
/label=FLAG
/note="FLAG(R) epitope tag, followed by an enterokinase
cleavage site"
misc_feature complement(4374..4451)
/label=MCS
/note="MCS"
regulatory complement(4458..5071)
/label=pUBQ10
/note="pUBQ10"
/regulatory_class="promoter"