我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pRNBZMB
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 3773 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- p15A ori
- 载体来源:
- Kumar D, Batra J, Komives C, Rathore AS.
- 启动子:
- rhaB
pRNBZMB 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pRNBZMB 载体序列
LOCUS 62056_18955 3773 bp DNA circular SYN 10-APR-2019
DEFINITION Cloning vector pRNBZMB, complete sequence.
ACCESSION MH507507
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 3773)
AUTHORS Kumar D, Batra J, Komives C, Rathore AS.
TITLE QbD Based Media Development for the Production of Fab Fragments in
E. coli
JOURNAL Bioengineering (Basel) 6 (2), E29 (2019)
PUBMED 30925730
REFERENCE 2 (bases 1 to 3773)
AUTHORS Kumar D, Batra J, Komives C, Rathore AS.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (20-JUN-2018) Chemical Engineering, Indian Institute of
Technology Delhi, Lab-94, Block-II, Hauz Khas, New Delhi, Delhi
110016, India
REFERENCE 3 (bases 1 to 3773)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
"Bioengineering (Basel)"; date: "2019"; volume: "6"; issue: "2";
pages: "E29"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(20-JUN-2018) Chemical Engineering, Indian Institute of Technology
Delhi, Lab-94, Block-II, Hauz Khas, New Delhi, Delhi 110016, India"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..3773
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
CDS 1..774
/codon_start=1
/transl_table=11
/product="Mal/Ranibizumab heavy chain"
/label=Mal/Ranibizumab heavy chain
/note="optimized for E. coli. expression"
/protein_id="QBW95968.1"
/translation="MKIKTGARILALSALTTMMFSASALAEVQLVESGGGLVQPGGSLR
LSCAASGYDFTHYGMNWVRQAPGKGLEWVGWINTYTGEPTYAADFKRRFTFSLDTSKST
AYLQMNSLRAEDTAVYYCAKYPYYYGTSHWYFDVWGQGTLVTVSSASTKGPSVFPLAPS
SKSTSGGTAALGCLVKDYFPEPVTVSWNSGALTSGVHTFPAVLQSSGLYSLSSVVTVPS
SSLGTQTYICNVNHKPSNTKVDKKVEPKSCDKTHL"
sig_peptide 813..878
/label=pelB signal sequence
/note="leader peptide for secretion"
CDS 1203..1520
/label=hIg-kappa-CL
/note="Human immunoglobulin kappa light chain constant
region"
terminator 1555..1602
/label=T7 terminator
/note="transcription terminator for bacteriophage T7 RNA
polymerase"
terminator 1700..1729
/label=T3Te terminator
/note="phage T3 early transcription terminator"
rep_origin 1759..2304
/label=p15A ori
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
terminator complement(2569..2596)
/label=T7Te terminator
/note="phage T7 early transcription terminator"
CDS complement(2623..3429)
/label=KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
promoter complement(3430..3520)
/label=cat promoter
/note="promoter of the E. coli cat gene encoding
chloramphenicol acetyltransferase"
promoter 3624..3742
/label=rhaB promoter
/note="promoter of the E. coli rhaBAD operon, conferring
tight induction with L-rhamnose and repression with
D-glucose in the presence of RhaR and RhaS (Giacalone et
al., 2006)"