我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pCMV-mCherry
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 5326 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Yang J, Lee J, Land MA, Lai S
pCMV-mCherry 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pCMV-mCherry 载体序列
LOCUS 62056_7205 5326 bp DNA circular SYN 14-AUG-2021
DEFINITION Cloning vector pCMV-mCherry, complete sequence.
ACCESSION MZ220611
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5326)
AUTHORS Yang J, Lee J, Land MA, Lai S, Igoshin OA, St-Pierre F.
TITLE A synthetic circuit for buffering gene dosage variation between
individual mammalian cells
JOURNAL Nat Commun 12 (1), 4132 (2021)
PUBMED 34226556
REFERENCE 2 (bases 1 to 5326)
AUTHORS Yang J, Lee J, Land MA, Lai S, Igoshin O, St-Pierre F.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (17-MAY-2021) Neuroscience, Baylor College of Medicine,
One Baylor Plaza, Suite S636, Houston, TX 77030, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 5326)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Nat
Commun"; date: "2021"; volume: "12"; issue: "1"; pages: "4132"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(17-MAY-2021) Neuroscience, Baylor College of Medicine, One Baylor
Plaza, Suite S636, Houston, TX 77030, USA"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5326
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
polyA_signal 611..658
/label=HSV TK poly(A) signal
/note="herpes simplex virus thymidine kinase
polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"
rep_origin 987..1575
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
enhancer 1750..2053
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 2054..2257
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 2742..3449
/codon_start=1
/label=mCherry
/note="monomeric derivative of DsRed fluorescent protein
(Shaner et al., 2004)"
/translation="MVSKGEEDNMAIIKEFMRFKVHMEGSVNGHEFEIEGEGEGRPYEG
TQTAKLKVTKGGPLPFAWDILSPQFMYGSKAYVKHPADIPDYLKLSFPEGFKWERVMNF
EDGGVVTVTQDSSLQDGEFIYKVKLRGTNFPSDGPVMQKKTMGWEASSERMYPEDGALK
GEIKQRLKLKDGGHYDAEVKTTYKAKKPVQLPGAYNVNIKLDITSHNEDYTIVEQYERA
EGRHSTGGMDELYK"
polyA_signal 3457..3681
/label=bGH poly(A) signal
/note="bovine growth hormone polyadenylation signal"
polyA_signal 3803..3924
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
rep_origin complement(3931..4386)
/direction=LEFT
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
promoter 4413..4517
/label=AmpR promoter
promoter 4519..4876
/label=SV40 promoter
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS join(4911..5326,1..376)
/codon_start=1
/label=NeoR/KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
/translation="MIEQDGLHAGSPAAWVERLFGYDWAQQTIGCSDAAVFRLSAQGRP
VLFVKTDLSGALNELQDEAARLSWLATTGVPCAAVLDVVTEAGRDWLLLGEVPGQDLLS
SHLAPAEKVSIMADAMRRLHTLDPATCPFDHQAKHRIERARTRMEAGLVDQDDLDEEHQ
GLAPAELFARLKASMPDGEDLVVTHGDACLPNIMVENGRFSGFIDCGRLGVADRYQDIA
LATRDIAEELGGEWADRFLVLYGIAAPDSQRIAFYRLLDEFF"