我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pSH179
- 载体抗性:
- Kanamycin
- 载体长度:
- 9436 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- pSa ori
- 载体来源:
- Hiekel SSH., Budhagatapalli NNB.
- 启动子:
- CaMV35S(enhanced)
pSH179 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pSH179 载体序列
LOCUS 62056_19680 9436 bp DNA circular SYN 31-AUG-2021
DEFINITION Cloning vector pSH179, complete sequence.
ACCESSION MT670352
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 9436)
AUTHORS Hiekel SSH., Budhagatapalli NNB.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (25-JUN-2020) Physiology and Cell Biology/Plant
Reproductive Biology, Leibniz Institute of Plant Genetics and Crop
Plant Research (IPK), Corrensstrasse 3, Gatersleben, Saxony-Anhalt
06466, Germany
REFERENCE 2 (bases 1 to 9436)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(25-JUN-2020) Physiology and Cell Biology/Plant Reproductive
Biology, Leibniz Institute of Plant Genetics and Crop Plant Research
(IPK), Corrensstrasse 3, Gatersleben, Saxony-Anhalt 06466, Germany"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9436
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
misc_feature complement(1..25)
/label=RB T-DNA repeat
/note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
regulatory 126..488
/label=TaU6p
/note="TaU6p"
/regulatory_class="promoter"
misc_RNA 510..585
/label=gRNA scaffold
/note="guide RNA scaffold for the Streptococcus pyogenes
CRISPR/Cas9 system"
misc_feature 586..592
/label=poly-T signal
/note="poly-T signal"
promoter 710..1385
/label=CaMV 35S promoter (enhanced)
/note="cauliflower mosaic virus 35S promoter with a
duplicated enhancer region"
CDS 1561..5661
/label=Cas9
/note="Cas9 (Csn1) endonuclease from the Streptococcus
pyogenes Type II CRISPR/Cas system"
terminator 5754..6006
/label=NOS terminator
/note="nopaline synthase terminator and poly(A) signal"
primer_bind complement(6015..6031)
/label=M13 fwd
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
polyA_signal 6170..6344
/label=CaMV poly(A) signal
/note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
misc_feature complement(6494..6518)
/label=LB T-DNA repeat
/note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA"
terminator complement(6797..6824)
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
terminator complement(6916..7002)
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
rep_origin complement(7171..7606)
/direction=LEFT
/label=pSa ori
/note="origin of replication from bacterial plasmid pSa"
rep_origin complement(7721..8309)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(8402..9208)
/label=KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"