pKOR1 载体图谱和序列

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:: pKOR1

载体抗性:: Ampicillin, Chloramphenicol

载体长度:: 10374 bp

载体类型:: Gene expression

复制子:: ori

宿主:: Staphylococcus aureus

感受态:: DB3.1

培养温度:: 37℃

pKOR1 载体图谱

复制序列 NovoBuilder中查看图谱

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pKOR1 载体序列

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LOCUS       V017235                10374 bp    DNA     circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION  Exported.
ACCESSION   V017235
VERSION     V017235
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
            .
REFERENCE   1  (bases 1 to 10374)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..10374
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     CDS             complement(1702..2325)
                     /label="TetR"
                     /note="tetracycline repressor TetR"
     protein_bind    2347..2365
                     /label="tet operator"
                     /note="bacterial operator O1 for the tetR and tetA genes"
     CDS             3721..4368
                     /gene="cat"
                     /label="Chloramphenicol acetyltransferase"
                     /note="Chloramphenicol acetyltransferase from
                     Staphylococcus aureus. Accession#: P00485"
     promoter        4578..4596
                     /label="T7 promoter"
                     /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase"
     protein_bind    4615..4846
                     /label="attP2"
                     /note="recombination site for the Gateway(R) BP reaction
                     (pDONR(TM)221 version)"
     promoter        4991..5093
                     /label="cat promoter"
                     /note="promoter of the E. coli cat gene encoding
                     chloramphenicol acetyltransferase"
     CDS             5094..5747
                     /label="CmR"
                     /note="chloramphenicol acetyltransferase"
     CDS             6097..6399
                     /label="ccdB"
                     /note="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"
     protein_bind    complement(6798..7029)
                     /label="attP1"
                     /note="recombination site for the Gateway(R) BP reaction"
     promoter        complement(7125..7155)
                     /label="lac promoter"
                     /note="promoter for the E. coli lac operon"
     protein_bind    complement(7170..7191)
                     /label="CAP binding site"
                     /note="CAP binding activates transcription in the presence
                     of cAMP."
     rep_origin      complement(7479..8067)
                     /direction=LEFT
                     /label="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     CDS             complement(8241..9098)
                     /label="AmpR"
                     /note="beta-lactamase"
     promoter        complement(9099..9203)
                     /label="AmpR promoter"

pKOR1 载体 (V017235)

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