pEGFP Tensin3 载体图谱和序列

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:: pEGFP Tensin3

载体抗性:: Kanamycin

载体长度:: 9055 bp

载体类型:: Protein expression

复制子:: ori

宿主:: Mammalian cells

筛选标记:: Neo/G418

启动子:: CMV

感受态:: DH5a

培养温度:: 37℃

pEGFP Tensin3 载体图谱

复制序列 NovoBuilder中查看图谱

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pEGFP Tensin3 载体序列

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LOCUS       V017369                 9055 bp    DNA     circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION  Exported.
ACCESSION   V017369
VERSION     V017369
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
            .
REFERENCE   1  (bases 1 to 9055)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..9055
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     rep_origin      6..594
                     /label="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     enhancer        758..1061
                     /label="CMV enhancer"
                     /note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
     promoter        1062..1265
                     /label="CMV promoter"
                     /note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
                     promoter"
     CDS             1310..2026
                     /label="EGFP"
                     /note="enhanced GFP"
     CDS             2063..6397
                     /gene="TNS3"
                     /label="Tensin-3"
                     /note="Tensin-3 from Homo sapiens. Accession#: Q68CZ2"
     polyA_signal    6551..6672
                     /label="SV40 poly(A) signal"
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
     rep_origin      complement(6679..7134)
                     /direction=LEFT
                     /label="f1 ori"
                     /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
                     indicates direction of (+) strand synthesis"
     promoter        7161..7265
                     /label="AmpR promoter"
     promoter        7267..7624
                     /label="SV40 promoter"
                     /note="SV40 enhancer and early promoter"
     CDS             7659..8450
                     /label="NeoR/KanR"
                     /note="aminoglycoside phosphotransferase"
     polyA_signal    8685..8732
                     /label="HSV TK poly(A) signal"
                     /note="herpes simplex virus thymidine kinase
                     polyadenylation signal (Cole and Stacy, 1985)"

pEGFP Tensin3 载体 (V017369)

pEGFP Tensin3 载体图谱

质粒操作方法

pEGFP Tensin3 载体序列