我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pWPI-N3ICD
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 13103 bp
- 载体类型:
- Protein expression
- 宿主:
- Lentivirus
- 启动子:
- EF1a
- 5'引物:
- PEF-F
- 感受态:
- NEB Stable
- 培养温度:
- 37℃
pWPI-N3ICD 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pWPI-N3ICD 载体序列
LOCUS . 13103 bp DNA linear UNK 01-JAN-1980
DEFINITION synthetic circular DNA.
ACCESSION
VERSION
KEYWORDS .
SOURCE .
ORGANISM .
.
FEATURES Location/Qualifiers
LTR 1..634
/label="3' LTR"
/note="3' long terminal repeat (LTR) from HIV-1"
misc_feature 681..806
/label="HIV-1 Ψ"
/note="packaging signal of human immunodeficiency virus
type 1"
misc_feature 1299..1532
/label="RRE"
/note="The Rev response element (RRE) of HIV-1 allows for
Rev-dependent mRNA export from the nucleus to the
cytoplasm."
CDS 1717..1761
/label="gp41 peptide"
/note="antigenic peptide corresponding to amino acids 655
to 669 of the HIV envelope protein gp41 (Lutje Hulsik et
al., 2013)"
CDS 1910..1951
/gene="Protein Tat"
/label="Protein Tat"
/note="Protein Tat from Human immunodeficiency virus type 1
group M subtype B (isolate WMJ22). Accession#: P12509"
promoter 2144..3322
/label="EF-1α promoter"
/note="strong constitutive promoter for human elongation
factor EF-1α"
misc_feature 5370..5487
/label="cPPT/CTS"
/note="central polypurine tract and central termination
sequence of HIV-1"
misc_feature 5541..6103
/label="IRES"
/note="internal ribosome entry site (IRES) of the
encephalomyocarditis virus (EMCV)"
CDS 6108..6824
/label="EGFP"
/note="the original enhanced GFP (Yang et al., 1996)"
misc_feature 6933..7521
/label="WPRE"
/note="woodchuck hepatitis virus posttranscriptional
regulatory element"
protein_bind complement(7665..7698)
/label="loxP"
/note="Cre-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence (ATGTATGC) (Shaw et al., 2021)."
promoter complement(7923..7941)
/label="SP6 promoter"
/note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"
promoter 8729..8833
/label="AmpR promoter"
CDS 8834..9691
/label="AmpR"
/note="β-lactamase"
promoter 10699..11028
/label="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
intron 12162..12227
/label="small t intron"
/note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron"
CDS 12357..12377
/label="SV40 NLS"
/note="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
40) large T antigen"
polyA_signal 12802..12936
/label="SV40 poly(A) signal"
/note="SV40 polyadenylation signal"