我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pUC18R6K-mini-Tn7T-Gm
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 4310 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- R6K γ ori
- 载体来源:
- Choi KH, Gaynor JB, White KG, Lopez C, Bosio CM, Karkhoff-Schweizer RR, Schweizer HP.
- 启动子:
- Pc
pUC18R6K-mini-Tn7T-Gm 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pUC18R6K-mini-Tn7T-Gm 载体序列
LOCUS 40924_45033 4310 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector pUC18R6K-mini-Tn7T-Gm, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4310)
AUTHORS Choi KH, Gaynor JB, White KG, Lopez C, Bosio CM, Karkhoff-Schweizer
RR, Schweizer HP.
TITLE A Tn7-based broad-range bacterial cloning and expression system
JOURNAL Nat. Methods 2 (6), 443-448 (2005)
PUBMED 15908923
REFERENCE 2 (bases 1 to 4310)
AUTHORS Choi K-H., Gaynor JB, White KG, Lopez C, Bosio CM,
Karkhoff-Schweizer RR, Schweizer HP.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (02-AUG-2005) Microbiology, Immunology and Pathology,
Colorado State University, Fort Collins, CO 80523, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 4310)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 4310)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Nat.
Methods"; date: "2005"; volume: "2"; issue: "6"; pages: "443-448"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(02-AUG-2005) Microbiology, Immunology and Pathology, Colorado State
University, Fort Collins, CO 80523, USA"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4310
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
repeat_region 382..580
/note="Tn7R; right end of Tn7"
primer_bind 585..601
/label=KS primer
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
terminator 629..723
/label=lambda t0 terminator
/note="transcription terminator from phage lambda"
terminator 826..912
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
protein_bind 958..1005
/label=FRT
/note="FLP-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence TCTAGAAA (Turan and Bode, 2011)."
CDS complement(1138..1668)
/label=GmR
/note="gentamycin acetyltransferase"
promoter complement(1857..1885)
/label=Pc promoter
/note="class 1 integron promoter"
misc_feature 1926..1973
/note="FRT; Flp recombinase target site"
protein_bind 1926..1973
/label=FRT
/bound_moiety="FLP recombinase from the Saccharomyces
cerevisiae 2u plasmid"
/note="FLP-mediated recombination occurs in the 8-bp core
sequence TCTAGAAA (Turan and Bode, 2011)."
misc_feature 2000..2077
/note="multiple cloning site; MCS"
mobile_element complement(2086..2251)
/label=Tn7L
/note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)"
rep_origin 2457..2841
/label=R6K gamma ori
/note="gamma replication origin from E. coli plasmid R6K;
requires the R6K initiator protein pi for replication"
CDS complement(3253..4110)
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
promoter complement(4111..4215)
/label=AmpR promoter