我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pXY2
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 7426 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Liu Y-H., Zhang X-X., Rainey PB.
- 启动子:
- Pc
pXY2 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pXY2 载体序列
LOCUS 40924_47378 7426 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018 DEFINITION Cloning vector pXY2, complete sequence. ACCESSION . VERSION . KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct REFERENCE 1 (bases 1 to 7426) AUTHORS Liu Y-H., Zhang X-X., Rainey PB. TITLE Construction of mini-Tn7 vectors for studying gene expression in Pseudomonas at post-transcriptional levels JOURNAL Unpublished REFERENCE 2 (bases 1 to 7426) AUTHORS Liu Y-H., Zhang X-X., Rainey PB. TITLE Direct Submission JOURNAL REFERENCE 3 (bases 1 to 7426) TITLE Direct Submission REFERENCE 4 (bases 1 to 7426) AUTHORS . TITLE Direct Submission COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Unpublished" COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted (15-JUL-2014) Institute of Natural " COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article" FEATURES Location/Qualifiers source 1..7426 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" mobile_element 382..580 /mobile_element_type="transposon:Tn7R" /label=n7R /note="Tn7R; right end of Tn7" primer_bind 585..601 /label=KS primer /note="common sequencing primer, one of multiple similar variants" terminator 629..723 /label=lambda t0 terminator /note="transcription terminator from phage lambda" terminator 826..912 /label=rrnB T1 terminator /note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB gene" protein_bind 958..1005 /label=FRT /note="FLP-mediated recombination occurs in the 8-bp core sequence TCTAGAAA (Turan and Bode, 2011)." CDS complement(1138..1668) /label=GmR /note="gentamycin acetyltransferase" promoter complement(1857..1885) /label=Pc promoter /note="class 1 integron promoter" misc_feature 1926..1973 /note="FRT; Flp recombinase target site" protein_bind 1926..1973 /label=FRT /bound_moiety="FLP recombinase from the Saccharomyces cerevisiae 2u plasmid" /note="FLP-mediated recombination occurs in the 8-bp core sequence TCTAGAAA (Turan and Bode, 2011)." CDS 2031..5084 /label=lacZ /note="beta-galactosidase" mobile_element complement(5172..5337) /label=Tn7L /note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)" rep_origin complement(5607..6195) /direction=LEFT /label=ori /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(6369..7226) /label=AmpR /note="beta-lactamase" promoter complement(7227..7331) /label=AmpR promoter