pZWHJ002 载体 (V001822)

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:
pZWHJ002
载体抗性:
Chloramphenicol
载体长度:
8349 bp
载体类型:
Promoter probe vector
复制子:
ori
载体来源:
Chao H, Zhou NY.

pZWHJ002 载体图谱

pZWHJ0028349 bp400800120016002000240028003200360040004400480052005600600064006800720076008000MCSrrnB T1 terminatorrrnB T2 terminatorAmpR promoteroriori pBL1CmRpsiGA1lacZ

质粒操作方法

1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pZWHJ002 载体序列

LOCUS       40924_48618        8349 bp DNA     circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION  Promoter probe vector pZWHJ002, complete sequence.
ACCESSION   .
VERSION     .
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 8349)
  AUTHORS   Chao H, Zhou NY.
  TITLE     GenR, an IclR-Type Regulator, Activates and Represses the 
            Transcription of gen Genes Involved in 3-Hydroxybenzoate and 
            Gentisate Catabolism in Corynebacterium glutamicum
  JOURNAL   J. Bacteriol. 195 (7), 1598-1609 (2013)
  PUBMED    23354754
REFERENCE   2  (bases 1 to 8349)
  AUTHORS   Chao H-J., Zhou N-Y.
  TITLE     Direct Submission
  JOURNAL   Submitted (09-JAN-2013) Key Laboratory of Agricultural and 
            Environmental Microbiology, Wuhan Institute of Virology, Chinese 
            Academy of Sciences, No. 44 Xiao Hong Shan, Wu Han, Hubei 430071, 
            P.R. China
REFERENCE   3  (bases 1 to 8349)
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   4  (bases 1 to 8349)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "J. 
            Bacteriol."; date: "2013"; volume: "195"; issue: "7"; pages: 
            "1598-1609"
COMMENT     SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted 
            (09-JAN-2013) Key Laboratory of Agricultural and Environmental 
            Microbiology, Wuhan Institute of Virology, Chinese Academy of 
            Sciences, No. 44 Xiao Hong Shan, Wu Han, Hubei 430071, P.R. China"
COMMENT     SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..8349
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     misc_feature    complement(1..57)
                     /label=MCS
                     /note="pUC18/19 multiple cloning site"
     terminator      265..351
                     /label=rrnB T1 terminator
                     /note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
                     gene"
     terminator      443..470
                     /label=rrnB T2 terminator
                     /note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
                     gene"
     promoter        489..580
                     /label=AmpR promoter
     rep_origin      complement(967..1555)
                     /direction=LEFT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
     rep_origin      1720..4274
                     /label=ori pBL1
                     /note="ori pBL1"
     CDS             complement(4409..5065)
                     /label=CmR
                     /note="chloramphenicol acetyltransferase"
     regulatory      complement(5131..5225)
                     /label=psiGA1
                     /note="psiGA1"
                     /regulatory_class="promoter"
     CDS             complement(5273..8344)
                     /label=lacZ
                     /note="beta-galactosidase"