我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pBABe-HA-ER-IPpoI
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6600 bp
- 载体类型:
- Mammalian Expression, Retroviral
- 复制子:
- ori
- 筛选标记:
- Puromycin
- 启动子:
- SV40
- 克隆方法:
- Restriction Enzyme
- 5'引物:
- PBABE 5'
pBABe-HA-ER-IPpoI 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pBABe-HA-ER-IPpoI 载体序列
LOCUS V000980 6600 bp DNA circular SYN 13-MAY-2021
DEFINITION Exported.
ACCESSION V000980
VERSION V000980
KEYWORDS pBABe-HA-ER-IPpoI
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 6600)
AUTHORS Berkovich E, Monnat RJ Jr, Kastan MB
TITLE Roles of ATM and NBS1 in chromatin structure modulation and DNA
double-strand break repair.
JOURNAL Nat Cell Biol. 2007 Jun;9(6):683-90. Epub 2007 May 7.
PUBMED 17486112
REFERENCE 2 (bases 1 to 6600)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 3 (bases 1 to 6600)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Nat Cell
Biol."; date: "2007-06"; volume: "9(6)"; pages: "683-90. Epub 2007
May 7"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6600
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
LTR 8..477
/label="LTR"
/note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia
virus"
misc_feature 542..741
/label="MMLV Psi"
/note="packaging signal of Moloney murine leukemia virus
(MMLV)"
CDS 942..1358
/label="gag (truncated)"
/note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag
gene lacking the start codon"
CDS 1386..1412
/label="HA"
/note="HA (human influenza hemagglutinin) epitope tag"
CDS 1800..2162
/gene="ESR1"
/label="Estrogen receptor"
/note="Estrogen receptor from Macaca mulatta. Accession#:
P49886"
promoter 2935..3264
/label="SV40 promoter"
/note="SV40 enhancer and early promoter"
CDS 3274..3870
/label="PuroR"
/note="puromycin N-acetyltransferase"
LTR 3972..4563
/label="LTR"
/note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia
virus"
primer_bind complement(4693..4710)
/label="L4440"
/note="L4440 vector, forward primer"
rep_origin complement(4864..5452)
/direction=LEFT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5615..6472)
/label="AmpR"
/note="beta-lactamase"
promoter complement(6473..6577)
/label="AmpR promoter"