pSV2-dhfr 载体图谱和序列

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:: pSV2-dhfr

载体抗性:: Ampicillin

载体长度:: 4900 bp

载体类型:: Mammalian Expression Vectors

复制子:: ori

筛选标记:: MTX

拷贝数:: High copy number

启动子:: SV40

克隆方法:: Enzyme digestion and ligation

5'引物:: SV40pro-F: TATTTATGCAGAGGCCGAGG

3'引物:: SV40pA-R: GAAATTTGTGATGCTATTGC

载体标签:: C-DHFR (mouse DHFR)

pSV2-dhfr 载体图谱

复制序列 NovoBuilder中查看图谱

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态，要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pSV2-dhfr 载体序列

下载GenBank文件(.gb)

LOCUS       40924_41559        4900 bp DNA     circular SYN 13-JAN-2022
DEFINITION  synthetic circular DNA.
ACCESSION   .
VERSION     .
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 4900)
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   2  (bases 1 to 4900)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..4900
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     promoter        10..339
                     /label=SV40 promoter
                     /note="SV40 enhancer and early promoter"
     CDS             362..922
                     /codon_start=1
                     /label=DHFR
                     /note="mouse dihydrofolate reductase"
                     /translation="MVRPLNCIVAVSQDMGIGKNGDLPWPPLRNEFKYFQRMTTTSSVE
                     GKQNLVIMGRKTWFSIPEKNRPLKDRINIVLSRELKEPPRGAHFLAKSLDDALRLIEQP
                     ELASKVDMVWIVGGSSVYQEAMNQPGHLRLFVTRIMQEFESDTFFPEIDLGKYKLLPEY
                     PGVLSEVQEEKGIKYKFEVYEKKD"
     intron          1082..1147
                     /label=small t intron
                     /note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron"
     CDS             1277..1297
                     /codon_start=1
                     /label=SV40 NLS
                     /note="nuclear localization signal of SV40 (simian virus
                     40) large T antigen"
                     /translation="PKKKRKV"
     polyA_signal    1722..1856
                     /label=SV40 poly(A) signal
                     /note="SV40 polyadenylation signal"
     promoter        2709..2813
                     /label=AmpR promoter
     CDS             2814..3671
                     /codon_start=1
                     /label=AmpR
                     /note="beta-lactamase"
                     /translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
                     ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
                     PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
                     EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
                     LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
                     LIKHW"
     rep_origin      3845..4433
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
     misc_feature    complement(4619..4759)
                     /label=bom
                     /note="basis of mobility region from pBR322"

pSV2-dhfr 载体 (V000607)

pSV2-dhfr 载体图谱

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pSV2-dhfr 载体序列