质粒编号
质粒名称
规格
价格
V012941
pG-KJE8
5 μg (冻干粉)
我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pG-KJE8
- 载体抗性:
- Chloramphenicol
- 载体长度:
- 11195 bp
- 载体类型:
- Packaging assistance
- 复制子:
- p15A ori
- 宿主:
- E. coli
- 感受态:
- DH5a
- 培养温度:
- 37℃
pG-KJE8 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pG-KJE8 载体序列
LOCUS V012941 11195 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION Exported.
ACCESSION V012941
VERSION V012941
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 11195)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..11195
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
CDS 1789..3702
/gene="dnaK"
/label="Chaperone protein DnaK"
/note="Chaperone protein DnaK from Escherichia coli O1:K1 /
APEC. Accession#: A1A766"
CDS 3794..4921
/gene="dnaJ"
/label="Chaperone protein DnaJ"
/note="Chaperone protein DnaJ from Escherichia coli (strain
K12). Accession#: P08622"
CDS 4941..5531
/gene="grpE"
/label="Protein GrpE"
/note="Protein GrpE from Escherichia coli (strain K12).
Accession#: P09372"
terminator 5837..5923
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 6015..6042
/label="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 6062..6153
/label="AmpR promoter"
rep_origin 6479..7023
/label="p15A ori"
/note="Plasmids containing the medium-copy-number p15A
origin of replication can be propagated in E. coli cells
that contain a second plasmid with the ColE1 origin."
CDS complement(7376..7999)
/label="TetR"
/note="tetracycline repressor TetR"
promoter 8015..8070
/label="tetR/tetA promoters"
/note="overlapping promoters for bacterial tetR and tetA"
CDS 8386..8439
/label="S loop"
/note="GroES chaperone mobile loop that interacts with
GroEL"
CDS 8678..10321
/gene="groEL"
/label="Chaperonin GroEL"
/note="Chaperonin GroEL from Escherichia coli O8 (strain
IAI1). Accession#: B7M8Q4"
terminator 10452..10538
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 10874..10976
/label="cat promoter"
/note="promoter of the E. coli cat gene encoding
chloramphenicol acetyltransferase"
CDS join(10977..11195,1..438)
/label="CmR"
/note="chloramphenicol acetyltransferase"