我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- Aqp3a_tWGU2-Strep
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 5310 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Eskova A, Chauvigne F, Maischein HM, Ammelburg M, Cerda J, Nusslein-Volhard C, Irion U.
- 启动子:
- CMV
Aqp3a_tWGU2-Strep 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
Aqp3a_tWGU2-Strep 载体序列
LOCUS 40924_275 5310 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector Aqp3a_tWGU2-Strep, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5310)
AUTHORS Eskova A, Chauvigne F, Maischein HM, Ammelburg M, Cerda J,
Nusslein-Volhard C, Irion U.
TITLE Gain-of-function mutations of mau/DrAqp3a influence zebrafish
pigment pattern formation through the tissue environment
JOURNAL Development (2017) In press
PUBMED 28506994
REFERENCE 2 (bases 1 to 5310)
AUTHORS Eskova A.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (21-DEC-2016) e-CNV group, Max Planck Institute for
Developmental Biology, Spemannstr. 35-39, Tuebingen 72076, Germany
REFERENCE 3 (bases 1 to 5310)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 5310)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Development
(2017) In press"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(21-DEC-2016) e-CNV group, Max Planck Institute for Developmental
Biology, Spemannstr. 35-39, Tuebingen 72076, Germany"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5310
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 42..421
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
promoter 422..625
/label=CMV promoter
/note="human cytomegalovirus (CMV) immediate early
promoter"
CDS 2094..2117
/codon_start=1
/label=Strep-Tag II
/note="peptide that binds Strep-Tactin(R), an engineered
form
of streptavidin"
/translation="WSHPQFEK"
CDS 2124..2147
/codon_start=1
/label=8xHis
/note="8xHis affinity tag"
/translation="HHHHHHHH"
polyA_signal 2186..2241
/label=beta-globin poly(A) signal
/note="rabbit beta-globin polyadenylation signal (Gil and
Proudfoot, 1987)"
promoter 3410..3514
/label=AmpR promoter
CDS 3515..4372
/codon_start=1
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 4546..5134
/direction=RIGHT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"