我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- p53-luc
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 5909 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Zheng C-F., Grafsky A.
p53-luc 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
p53-luc 载体序列
LOCUS 40924_2882 5909 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector p53-luc, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5909)
AUTHORS Zheng C-F., Grafsky A.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (03-AUG-1998) Technical Services, Stratagene, 11011 N.
Torrey PInes Rd., La Jolla, CA 92037, USA
REFERENCE 2 (bases 1 to 5909)
AUTHORS Zheng C-F., Grafsky A.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (29-DEC-1998) Technical Services, Stratagene, 11011 N.
Torrey PInes Rd., La Jolla, CA 92037, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 5909)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 5909)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(03-AUG-1998) Technical Services, Stratagene, 11011 N. Torrey PInes
Rd., La Jolla, CA 92037, USA"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(29-DEC-1998) Technical Services, Stratagene, 11011 N. Torrey PInes
Rd., La Jolla, CA 92037, USA"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
COMMENT On Dec 30, 1998 this sequence version replaced gi:3548971.
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5909
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter 32..136
/label=AmpR promoter
CDS 137..994
/codon_start=1
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRIDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 1168..1755
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature complement(1934..2074)
/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
polyA_signal 2313..2447
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
polyA_signal 2541..2673
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
CDS 3030..4679
/codon_start=1
/label=luciferase
/note="firefly luciferase"
/translation="MEDAKNIKKGPAPFYPLEDGTAGEQLHKAMKRYALVPGTIAFTDA
HIEVNITYAEYFEMSVRLAEAMKRYGLNTNHRIVVCSENSLQFFMPVLGALFIGVAVAP
ANDIYNERELLNSMNISQPTVVFVSKKGLQKILNVQKKLPIIQKIIIMDSKTDYQGFQS
MYTFVTSHLPPGFNEYDFVPESFDRDKTIALIMNSSGSTGLPKGVALPHRTACVRFSHA
RDPIFGNQIIPDTAILSVVPFHHGFGMFTTLGYLICGFRVVLMYRFEEELFLRSLQDYK
IQSALLVPTLFSFFAKSTLIDKYDLSNLHEIASGGAPLSKEVGEAVAKRFHLPGIRQGY
GLTETTSAILITPEGDDKPGAVGKVVPFFEAKVVDLDTGKTLGVNQRGELCVRGPMIMS
GYVNNPEATNALIDKDGWLHSGDIAYWDEDEHFFIVDRLKSLIKYKGYQVAPAELESIL
LQHPNIFDAGVAGLPDDDAGELPAAVVVLEHGKTMTEKEIVDYVASQVTTAKKLRGGVV
FVDEVPKGLTGKLDARKIREILIKAKKGGKSKL"
intron 4813..4878
/label=small t intron
/note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron"
polyA_signal 5448..5582
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
RBS 5617..5625
/label=Shine-Dalgarno sequence
/note="full consensus sequence for ribosome-binding sites
upstream of start codons in E. coli; complementary to a
region in the 3' end of the 16S rRNA (Chen et al., 1994)"