我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pCX4hyg
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6824 bp
- 载体类型:
- Retroviral vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Akagi T, Sasai K, Hanafusa H.
pCX4hyg 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pCX4hyg 载体序列
LOCUS 40924_13955 6824 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Retroviral vector pCX4hyg DNA, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 6824)
AUTHORS Akagi T, Sasai K, Hanafusa H.
TITLE Refractory nature of normal human diploid fibroblasts with respect
to oncogene-mediated transformation
JOURNAL Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100 (23), 13567-13572 (2003)
PUBMED 14597713
REFERENCE 2 (bases 1 to 6824)
AUTHORS Akagi T.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (10-JUN-2002) Tsuyoshi Akagi, Osaka Bioscience Institute,
Molecular Oncology; Furuedai 6-2-4, Suita, Osaka 565-0874, Japan
(E-mail:takagi@obi.or.jp, Tel:81-6-6872-4834, Fax:81-6-6871-7521)
REFERENCE 3 (bases 1 to 6824)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 6824)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Proc. Natl.
Acad. Sci. U.S.A."; date: "2003"; volume: "100"; issue: "23"; pages:
"13567-13572"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(10-JUN-2002) Tsuyoshi Akagi, Osaka Bioscience Institute, Molecular
Oncology"; volume: " Furuedai 6-2-4, Suita, Osaka 565-0874, Japan
(E-mail:takagi@obi.or.jp, Tel:81-6-6872-4834, Fax"; pages:
"81-6-6871-7521"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6824
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
enhancer 88..467
/label=CMV enhancer
/note="human cytomegalovirus immediate early enhancer"
repeat_region 467..762
/label=R-U5 region of MuLV 5' LTR
/note="R-U5 region of MuLV 5' LTR"
misc_feature 826..1183
/label=MMLV Psi
/note="packaging signal of Moloney murine leukemia virus
(MMLV)"
CDS 1242..1658
/codon_start=1
/label=gag (truncated)
/note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag
gene lacking the start codon"
/translation="GQTVTTPLSLTLGHWKDVERIAHNQSVDVKKRRWVTFCSAEWPTF
NVGWPRDGTFNRDLITQVKIKVFSPGPHGHPDQVPYIVTWEALAFDPPPWVKPFVHPKP
PPPLPPSAPSLPLEPPRSTPPRSSLYPALTPSLGA"
misc_feature 1668..2042
/label=pol region
/note="Moloney murine leukemia virus (MMLV) pol region
containing the splice acceptor site"
misc_feature 2044..2106
/label=multiple cloning site
/note="multiple cloning site"
misc_feature 2154..2731
/label=IRES2
/note="internal ribosome entry site (IRES) of the
encephalomyocarditis virus (EMCV)"
CDS 2757..3773
/codon_start=1
/label=HygR
/note="aminoglycoside phosphotransferase from E. coli"
/translation="KPELTATSVEKFLIEKFDSVSDLMQLSEGEESRAFSFDVGGRGYV
LRVNSCADGFYKDRYVYRHFASAALPIPEVLDIGEFSESLTYCISRRAQGVTLQDLPET
ELPAVLQPVAEAMDAIAAADLSQTSGFGPFGPQGIGQYTTWRDFICAIADPHVYHWQTV
MDDTVSASVAQALDELMLWAEDCPEVRHLVHADFGSNNVLTDNGRITAVIDWSEAMFGD
SQYEVANIFFWRPWLACMEQQTRYFERRHPELAGSPRLRAYMLRIGLDQLYQSLVDGNF
DDAAWAQGRCDAIVRSGAGTVGRTQIARRSAAVWTDGCVEVLADSGNRRPSTRPRAKE"
LTR 4119..4710
/label=LTR
/note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia
virus"
rep_origin complement(5011..5599)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(5766..6623)
/codon_start=1
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPVAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
promoter complement(6624..6728)
/label=AmpR promoter