我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pDM326
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6431 bp
- 载体类型:
- Expression vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Veltman DM, Akar G, Bosgraaf L, Van Haastert PJ.
pDM326 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pDM326 载体序列
LOCUS V007974 6431 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018 DEFINITION Exported. ACCESSION V007974 VERSION V007974 KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct . REFERENCE 1 (bases 1 to 6431) AUTHORS Veltman DM, Akar G, Bosgraaf L, Van Haastert PJ. TITLE A new set of small, extrachromosomal expression vectors for Dictyostelium discoideum JOURNAL Plasmid 61 (2), 110-118 (2009) PUBMED 19063918 REFERENCE 2 (bases 1 to 6431) AUTHORS Veltman DM, Akar G, Bosgraaf L, van Haastert PJM. TITLE Direct Submission JOURNAL Submitted (19-JUL-2008) Cell Biochemistry, Rijks Universiteit Groningen, Kerklaan 30, Haren 9751 NN, The Netherlands REFERENCE 3 (bases 1 to 6431) TITLE Direct Submission REFERENCE 4 (bases 1 to 6431) AUTHORS . TITLE Direct Submission COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Plasmid"; date: "2009"; volume: "61"; issue: "2"; pages: "110-118" SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted (19-JUL-2008) Cell Biochemistry, Rijks Universiteit Groningen, Kerklaan 30, Haren 9751 NN, The Netherlands" SGRef: number: 3; type: "Journal Article" FEATURES Location/Qualifiers source 1..6431 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" regulatory 14..303 /label="act15 promoter" /note="act15 promoter" /regulatory_class="promoter" regulatory 332..594 /label="act8 terminator" /note="act8 terminator" /regulatory_class="terminator" CDS 606..1091 /codon_start=1 /product="D1'" /label="D1'" /protein_id="ACH81556.1" /translation="FEKVNSNYYKIQSESTQINSNEIADLKKFIKEEVNKTSSKIDFFL VSSTDALSNPENYSLLEVKCINCHSLCQGKNLYISCTRDGCQNNICYNCLGININIYNV VINSKLCPPCFNDSVINKKCAMCSKNGTKCNLNQECKLHLCAQCSKKCLYILRVKTN" CDS 1594..2358 /codon_start=1 /product="D5" /label="D5" /protein_id="ACH81557.1" /translation="MYSTTLLFFLFFFIVSKSSVLQNDQIEVKYFQLLIVMYQKENCVE KSMTGAVIYDECNIHGRVETNSTHALFYDDIETNNSRCNNFRNLTNLIKLNECINDEFG ESILYKEYNETDDGYLFRVEDSFVEITSLSMDCTKNSKTIIEKFNICSKFENVYHITNI TQEKSNRFTCTDPLCHYCKNENIQNNLDFKTTKCTPKYGASDSEFLSTIYNPKLDGSNN GMEKSVTQEKNISNNLKINIYLIFFLIIFLIK" CDS complement(2366..2959) /codon_start=1 /product="G5" /label="G5" /protein_id="ACH81558.1" /translation="MFNHIKDSGYYATNEEIEIFLESCTLCKEITAQTKRNSYKKRNII NKLPEEEEEEEEEEEEEEEEEEQEEEVEKPTISEEEEEETPAVSEEEKEEEEQEEDKEK DKEKKIEEDTETGKKKDEVMNERQDGIEISEKTNDKPTEKTKVKKNVSRVKDINLHKKG NPITPKKIKNFSQQQLRLASGVSNEKRAIITLKK" rep_origin 2869..3411 /label="Ddp1 ori" /note="Ddp1 ori" rep_origin complement(3742..4330) /direction=LEFT /label="ori" /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(4504..5361) /label="AmpR" /note="beta-lactamase" promoter complement(5362..5466) /label="AmpR promoter" regulatory complement(5513..5768) /label="mhcA terminator" /note="mhcA terminator" /regulatory_class="terminator" CDS complement(5778..6197) /gene="bsr" /label="Blasticidin-S deaminase" /note="Blasticidin-S deaminase from Bacillus cereus. Accession#: P33967" regulatory complement(6209..6430) /label="act6 promoter" /note="act6 promoter" /regulatory_class="promoter"