首页技术支持质粒载体

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

The pGreenII 62-SK vector is optimized for the plant system, it shows excellent adaptability and high efficiency in plant gene expression research, better driving plant gene expression. At the same time, this vector has high stability and repeatability, ensuring reliable experimental results.
Helper plasmid eg: pSoup could faciliate its replication in Agrobacterium.

载体名称:
pGreenII 62-SK
载体抗性:
Kanamycin
载体长度:
3338 bp
载体类型:
Plant Expression
复制子:
pSa ori
宿主:
Plants
启动子:
CaMV 35S
感受态:
DH5α
培养温度:
37℃

pGreenII 62-SK 载体图谱

pGreenII 62-SK3338 bp6001200180024003000LB T-DNA repeatCaMV 35S promoterMCSCaMV poly(A) signalRB T-DNA repeatoriKanRpSa ori

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pGreenII 62-SK 载体序列

LOCUS       Exported                3338 bp DNA     circular SYN 03-SEP-2024
DEFINITION  synthetic circular DNA.
ACCESSION   .
VERSION     .
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
REFERENCE   1  (bases 1 to 3338)
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   2  (bases 1 to 3338)
  TITLE     Direct Submission
REFERENCE   3  (bases 1 to 3338)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
COMMENT     SGRef: number: 1; type: "Journal Article"
COMMENT     SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..3338
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     misc_feature    534..556
                     /label=LB T-DNA repeat
                     /note="left border repeat from nopaline C58 T-DNA
                     (truncated)"
     promoter        628..973
                     /label=CaMV 35S promoter
                     /note="strong constitutive promoter from cauliflower mosaic
                     virus"
     misc_feature    983..1090
                     /label=MCS
                     /note="pBluescript multiple cloning site"
     polyA_signal    1144..1320
                     /label=CaMV poly(A) signal
                     /note="cauliflower mosaic virus polyadenylation signal"
     misc_feature    1330..1354
                     /label=RB T-DNA repeat
                     /note="right border repeat from nopaline C58 T-DNA"
     rep_origin      complement(1445..2033)
                     /direction=LEFT
                     /label=ori
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of 
                     replication"
     CDS             complement(2207..3019)
                     /codon_start=1
                     /label=KanR
                     /note="aminoglycoside phosphotransferase"
                     /translation="MSHIQRETSCSRPRLNSNMDADLYGYKWARDNVGQSGATIYRLYG
                     KPDAPELFLKHGKGSVANDVTDEMVRLNWLTEFMPLPTIKHFIRTPDDAWLLTTAIPGK
                     TAFQVLEEYPDSGENIVDALAVFLRRLHSIPVCNCPFNSDRVFRLAQAQSRMNNGLVDA
                     SDFDDERNGWPVEQVWKEMHKLLPFSPDSVVTHGDFSLDNLIFDEGKLIGCIDVGRVGI
                     ADRYQDLAILWNCLGEFSPSLQKRLFQKYGIDNPDMNKLQFHLMLDEFF"
     rep_origin      3310..3338
                     /label=pSa ori
                     /note="origin of replication from bacterial plasmid pSa"