我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- MP6
- 载体抗性:
- Chloramphenicol
- 载体长度:
- 6681 bp
- 载体类型:
- Bacterial Expression
- 复制子:
- CloDF13 ori
- 拷贝数:
- High Copy
- 启动子:
- araBAD
- 克隆方法:
- Ligation Independent Cloning
- 5'引物:
- pBAD-F
- 3'引物:
- CAT-F
- 感受态:
- DH10B
- 培养温度:
- 37℃
MP6 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
MP6 载体序列
LOCUS V006635 6681 bp DNA circular SYN 13-MAY-2021
DEFINITION Exported.
ACCESSION V006635
VERSION V006635
KEYWORDS MP6
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 6681)
AUTHORS Badran AH, Liu DR
TITLE Development of potent in vivo mutagenesis plasmids with broad
mutational spectra.
JOURNAL Nat Commun. 2015 Oct 7;6:8425. doi: 10.1038/ncomms9425.
PUBMED 26443021
REFERENCE 2 (bases 1 to 6681)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 3 (bases 1 to 6681)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Nat
Commun."; date: "2015-10-7"; pages: "
10.1038/ncomms9425"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..6681
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
promoter 1..285
/label="araBAD promoter"
/note="promoter of the L-arabinose operon of E. coli; the
araC regulatory gene is transcribed in the opposite
direction (Guzman et al., 1995)"
CDS 335..1063
/gene="dnaQ"
/label="DNA polymerase III subunit epsilon"
/note="DNA polymerase III subunit epsilon from Escherichia
coli (strain K12). Accession#: P03007"
CDS 1095..1928
/gene="dam"
/label="DNA adenine methylase"
/note="DNA adenine methylase from Escherichia coli (strain
K12). Accession#: P0AEE8"
CDS 1960..2502
/gene="seqA"
/label="Negative modulator of initiation of replication"
/note="Negative modulator of initiation of replication from
Escherichia coli (strain K12). Accession#: P0AFY8"
CDS 2534..3061
/gene="mprA"
/label="Transcriptional repressor MprA"
/note="Transcriptional repressor MprA from Escherichia coli
(strain K12). Accession#: P0ACR9"
CDS 3093..3344
/label="UGI"
/note="uracil-DNA glycosylase inhibitor from a Bacillus
subtilis bacteriophage (Mol et al., 1995)"
CDS 3377..4000
/label="PmCDA1"
/note="cytidine deaminase from the sea lamprey Petromyzon
marinus (Rogozin et al., 2007)"
terminator complement(4030..4061)
/label="tonB terminator"
/note="bidirectional E. coli tonB-P14 transcription
terminator"
CDS complement(4080..4736)
/label="CmR"
/note="chloramphenicol acetyltransferase"
rep_origin complement(4889..5627)
/direction=LEFT
/label="CloDF13 ori"
/note="Plasmids containing the CloDF13 (CDF) origin of
replication can be propagated in E. coli cells that contain
additional plasmids with compatible origins."
terminator complement(5720..5763)
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
CDS complement(5780..6655)
/label="araC"
/note="L-arabinose regulatory protein"