我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pGT1
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 11207 bp
- 载体类型:
- Dual-tagging gene trap vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Lukacsovich T, Asztalos Z, Awano W, Baba K, Kondo S, Niwa S, Yamamoto D.
- 启动子:
- DmHsp70
pGT1 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pGT1 载体序列
LOCUS 40924_22774 11207 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Dual-tagging gene trap vector pGT1 DNA, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 11207)
AUTHORS Lukacsovich T, Asztalos Z, Awano W, Baba K, Kondo S, Niwa S,
Yamamoto D.
TITLE Dual-tagging gene trap of novel genes in Drosophila melanogaster
JOURNAL Genetics 157 (2), 727-742 (2001)
PUBMED 11156992
REFERENCE 2 (bases 1 to 11207)
AUTHORS Lukacsovich T.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (31-MAY-1999) Tamas Lukacsovich, University of California,
Irvine, Developmental and Cell Biology; Room 4444, McGaugh Hall,
Irvine, California 92697-2300, USA (E-mail:tlukacs@uci.edu,
Tel:1-949-824-3226, Fax:1-949-824-3571)
REFERENCE 3 (bases 1 to 11207)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 11207)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Genetics";
date: "2001"; volume: "157"; issue: "2"; pages: "727-742"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(31-MAY-1999) Tamas Lukacsovich, University of California, Irvine,
Developmental and Cell Biology"; volume: " Room 4444, McGaugh Hall,
Irvine, California 92697-2300, USA (E-mail:tlukacs@uci.edu,
Tel:1-949-824-3226, Fax"; pages: "1-949-824-3571"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..11207
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
source 5409..8290
/mol_type="other DNA"
/db_xref="taxon:7227"
/organism="Drosophila melanogaster"
misc_feature complement(1..233)
/label=P element 3' end
/note="P element 3' end"
CDS 275..2917
/label=GAL4
/note="GAL4 transcriptional activator"
CDS complement(3627..4418)
/label=NeoR/KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"
promoter complement(4461..4909)
/label=hsp70 promoter
/note="Drosophila melanogaster hsp70Bb promoter"
CDS join(5409..5480,5846..6146,6221..6875,6908..7253,7474..7605,
7676..8290)
/codon_start=1
/gene="mini-white"
/product="white protein"
/label=mini-white
/protein_id="BAA78210.1"
/translation="MGQEDQELLIRGGSKHPSAEHLNNLIFEIPYHCRVTADASQSCIN
QGFGQAKNYGTLLPPSPPEDSGSGSGQLAENLTYAWHNMDIFGAVNQPGSGWRQLVNRT
RGLFCNERHIPAPRKHLLKNVCGVAYPGELLAVMGSSGAGKTTLLNALAFRSPQGIQVS
PSGMRLLNGQPVDAKEMQARCAYVQQDDLFIGSLTAREHLIFQAMVRMPRHLTYRQRVA
RVDQVIQELSLSKCQHTIIGVPGRVKGLSGGERKRLAFASEALTDPPLLICDEPTSGLD
SFTAHSVVQVLKKLSQKGKTVILTIHQPSSELFELFDKILLMAEGRVAFLGTPSEAVDF
FSYITLHLNSYPAWVPSVLPTTIRRTFTYRCWPLCPDGRSSPVIGSPRYGDNFAISKVA
RDMEQLLATKNLEKPLEQPENGYTYKATWFMQFRAVLWRSWLSVLKEPLLVKVRLIQTT
MVAILIGLIFLGQQLTQVGVMNINGAIFLFLTNMTFQNVFATINVFTSELPVFMREARS
RLYRCDTYFLGKTIAELPLFLTVPLVFTAIAYPMIGLRAGVLHFFNCLALVTLVANVST
SFGYLISCASSSTSMALSVGPPVIIPFLLFGGFFLNSGSVPVYLKWLSYLSWFRYANEG
LLINQWADVEPGEISCTSSNTTCPSSGKVILETLNFSAADLPLDYVGLAILIVSFRVLA
YLALRLRARRKE"
gene join(5409..5480,5846..6146,6221..6875,6908..7253,7474..7605,
7676..8290)
/gene="mini-white"
/label=mini-white
rep_origin complement(8682..9270)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(9444..10301)
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
promoter complement(10302..10406)
/label=AmpR promoter