我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pMRE105_PnptII_eYFP
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 13484 bp
- 载体类型:
- Tn7 delivery vector
- 复制子:
- pSC101 ori
- 载体来源:
- Remus-Emsermann MNP., Gisler P, Drissner D.
- 启动子:
- araBAD
pMRE105_PnptII_eYFP 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pMRE105_PnptII_eYFP 载体序列
LOCUS V004476 13484 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V004476
VERSION V004476
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 13484)
AUTHORS Remus-Emsermann MNP., Gisler P, Drissner D.
TITLE MiniTn7-transposon delivery vectors for inducible or constitutive
fluorescent protein expression in Enterobacteriaceae
JOURNAL Unpublished
REFERENCE 2 (bases 1 to 13484)
AUTHORS Remus-Emsermann MNP., Drissner D.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (23-MAR-2016) Institute for Food Sciences, Agroscope,
Schloss 1, Waedenswil, Zurich 8820, Switzerland
REFERENCE 3 (bases 1 to 13484)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 13484)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName:
"Unpublished"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(23-MAR-2016) Institute for Food Sciences, Agroscope, Schloss 1,
Waedenswil, Zurich 8820, Switzerland"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..13484
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
CDS complement(149..1024)
/label="araC"
/note="L-arabinose regulatory protein"
promoter 1051..1335
/label="araBAD promoter"
/note="promoter of the L-arabinose operon of E. coli; the
araC regulatory gene is transcribed in the opposite
direction (Guzman et al., 1995)"
CDS 1453..2271
/gene="tnsA"
/label="Transposon Tn7 transposition protein TnsA"
/note="Transposon Tn7 transposition protein TnsA from
Escherichia coli. Accession#: P13988"
CDS 2261..4366
/gene="tnsB"
/label="Transposon Tn7 transposition protein TnsB"
/note="Transposon Tn7 transposition protein TnsB from
Escherichia coli. Accession#: P13989"
CDS 4366..6030
/gene="tnsC"
/label="Transposon Tn7 transposition protein TnsC"
/note="Transposon Tn7 transposition protein TnsC from
Escherichia coli. Accession#: P05846"
CDS 6036..7562
/codon_start=1
/gene="tnsD"
/product="TnsD"
/label="tnsD"
/note="Tn7 transposition site-selector"
/protein_id="AMZ00009.1"
/translation="MRNFPVPYSNELIYSTIARAGVYQGIVSPKQLLDEVYGNRKVVAT
LGLPSHLGVIARHLHQTGRYAVQQLIYEHTLFPLYAPFVGKERRDEAIRLMEYQAQGAV
HLMLGVAASRVKSDNRFRYCPDCVALQLNRYGEAFWQRDWYLPALPYCPKHGALVFFDR
AVDDHRHQFWALGHTELLSDYPKDSLSQLTALAAYIAPLLDAPRAQELSPSLEQWTLFY
QRLAQDLGLTKSKHIRHDLVAERVRQTFSDEALEKLDLKLAENKDTCWLKSIFRKHRKA
FSYLQHSIVWQALLPKLTVIEALQQASALTEHSITTRPVSQSVQPNSEDLSVKHKDWQQ
LVHKYQGIKAARQSLEGGVLYAWLYRHDRDWLVHWNQQHQQERLAPAPRVDWNQRDRIA
VRQLLRIIKRLDSSLDHPRATSSWLLKQTPNGTSLAKNLQKLPLVALCLKRYSESVEDY
QIRRISQAFIKLKQEDVELRRWRLLRSATLSKERITEEAQRFLEMVYGEE"
gene 6036..7562
/gene="tnsD"
/label="tnsD"
terminator 8196..8282
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 8374..8401
/label="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 8420..8511
/label="AmpR promoter"
CDS 8512..9369
/label="AmpR"
/note="beta-lactamase"
oriT complement(9543..9652)
/direction=LEFT
/label="oriT"
/note="incP origin of transfer"
rep_origin 10392..10614
/label="pSC101 ori"
/note="low-copy replication origin that requires the Rep101
protein"
CDS 10662..11609
/label="Rep101(Ts)"
/note="temperature-sensitive version of the RepA protein
needed for replication with the pSC101 origin (Armstrong et
al., 1984)"
mobile_element 12045..12210
/label="Tn7L"
/note="mini-Tn7 element (left end of the Tn7 transposon)"
CDS 12509..13225
/label="EYFP"
/note="enhanced YFP"
repeat_region 13273..13484
/label="Tn7 right end"
/note="Tn7 right end"