我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pMTL007S-E2
- 载体长度:
- 9196 bp
- 载体类型:
- ClosTron mutagenesis vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Heap JT, Kuehne SA, Ehsaan M, Cartman ST, Cooksley CM, Scott JC, Minton NP.
pMTL007S-E2 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pMTL007S-E2 载体序列
LOCUS V004420 9196 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Exported.
ACCESSION V004420
VERSION V004420
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
.
REFERENCE 1 (bases 1 to 9196)
AUTHORS Heap JT, Kuehne SA, Ehsaan M, Cartman ST, Cooksley CM, Scott JC,
Minton NP.
TITLE The ClosTron: Mutagenesis in Clostridium refined and streamlined
JOURNAL J. Microbiol. Methods 80 (1), 49-55 (2010)
PUBMED 19891996
REFERENCE 2 (bases 1 to 9196)
AUTHORS Heap JT, Kuehne KA, Ehsaan M, Cartman ST, Cooksley CM, Minton NP.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (28-SEP-2010) School of Molecular Medical Sciences, The
University of Nottingham, Centre for Biomolecular Sciences,
Nottingham, Nottinghamshire NG72RD, UK
REFERENCE 3 (bases 1 to 9196)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 9196)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "J.
Microbiol. Methods"; date: "2010"; volume: "80"; issue: "1"; pages:
"49-55"
SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(28-SEP-2010) School of Molecular Medical Sciences, The University
of Nottingham, Centre for Biomolecular Sciences, Nottingham,
Nottinghamshire NG72RD, UK"
SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..9196
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
CDS 233..406
/label="lacZ-alpha"
/note="LacZ-alpha fragment of beta-galactosidase"
protein_bind complement(814..847)
/label="FRT (minimal)"
/bound_moiety="FLP recombinase from the Saccharomyces
cerevisiae 2u plasmid"
/note="supports FLP-mediated excision but not integration
(Turan and Bode, 2011)"
CDS complement(864..1598)
/gene="ermBP"
/label="rRNA adenine N-6-methyltransferase"
/note="rRNA adenine N-6-methyltransferase from Enterococcus
faecalis. Accession#: P0A4D5"
protein_bind complement(2101..2134)
/label="FRT (minimal)"
/note="supports FLP-mediated excision but not integration
(Turan and Bode, 2011)"
RBS 2392..2414
/label="RBS"
/note="efficient ribosome binding site from bacteriophage
T7 gene 10 (Olins and Rangwala, 1989)"
CDS 2606..4402
/gene="ltrA"
/label="Group II intron-encoded protein LtrA"
/note="Group II intron-encoded protein LtrA from
Lactococcus lactis subsp. cremoris (strain MG1363).
Accession#: P0A3U1"
terminator 4590..4676
/label="rrnB T1 terminator"
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 4768..4795
/label="rrnB T2 terminator"
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
rep_origin 7640..8228
/direction=RIGHT
/label="ori"
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
oriT 8549..8658
/label="oriT"
/note="incP origin of transfer"
CDS 8691..9059
/label="traJ"
/note="oriT-recognizing protein"