我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pSEAPBhBCTNf3
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 11420 bp
- 载体类型:
- Mammalian expression vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R.
pSEAPBhBCTNf3 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pSEAPBhBCTNf3 载体序列
LOCUS 40924_39098 11420 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018 DEFINITION Mammalian expression vector pSEAPBhBCTNf3, complete sequence. ACCESSION . VERSION . KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct REFERENCE 1 (bases 1 to 11420) AUTHORS De Schamphelaire W, Olbrechts A, Meert J, Verhelst K, Roggeman Fonseca M, Vanhoucke M, Beyaert R. TITLE BCCM/LMBP Plasmid collection JOURNAL Unpublished REFERENCE 2 (bases 1 to 11420) AUTHORS De Schamphelaire W. TITLE Direct Submission JOURNAL Submitted (02-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent, Technologiepark 927, 9052, BELGIUM REFERENCE 3 (bases 1 to 11420) TITLE Direct Submission REFERENCE 4 (bases 1 to 11420) AUTHORS . TITLE Direct Submission COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Unpublished" COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted (02-FEB-2017) BCCM/LMBP, Universiteit Gent, Technologiepark 927, 9052, BELGIUM" COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article" FEATURES Location/Qualifiers source 1..11420 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" misc_feature 52..3504 /label=5' flanking region of human BCTN /note="5' flanking region of human BCTN" regulatory 3505..4499 /label=human BCTN promoter region /note="human BCTN promoter region" /regulatory_class="promoter" misc_feature 4500..4665 /label=5' UTR of human BCTN /note="5' UTR of human BCTN" misc_feature 4666..5668 /label=part of intron 1 of human BCTN /note="part of intron 1 of human BCTN" CDS 5667..7181 /label=SEAP /note="secreted alkaline phosphatase from human placenta" CDS 7715..7789 /codon_start=1 /note="unnamed protein product; part of SV40 small t-antigen" /protein_id="SJL88318.1" /translation="DLCEGTLLLWCDIIGQTTYRDLKL" intron 7791..7856 /label=small t intron /note="SV40 (simian virus 40) small t antigen intron" CDS 7986..8006 /label=SV40 NLS /note="nuclear localization signal of SV40 (simian virus 40) large T antigen" polyA_signal 8431..8565 /label=SV40 poly(A) signal /note="SV40 polyadenylation signal" rep_origin complement(8878..9466) /direction=LEFT /label=ori /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(9640..10497) /label=AmpR /note="beta-lactamase" promoter complement(10498..10602) /label=AmpR promoter rep_origin 10629..11084 /direction=RIGHT /label=f1 ori /note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow indicates direction of (+) strand synthesis" polyA_signal 11274..11395 /label=SV40 poly(A) signal /note="SV40 polyadenylation signal"