我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pXB300
- 载体抗性:
- Tetracycline
- 载体长度:
- 4697 bp
- 载体类型:
- Expression vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Bina XR, Wong EA, Bina TF, Bina JE.
- 启动子:
- tetR/tetAs
pXB300 载体载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pXB300 载体载体序列
LOCUS 40924_47118 4697 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018
DEFINITION Expression vector pXB300, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 4697)
AUTHORS Bina XR, Wong EA, Bina TF, Bina JE.
TITLE Construction of a tetracycline inducible expression vector and
characterization of its use in Vibrio cholerae
JOURNAL Plasmid 76C, 87-94 (2014)
PUBMED 25451701
REFERENCE 2 (bases 1 to 4697)
AUTHORS Bina JE.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (23-OCT-2014) Microbiology and Molecular Genetics,
University of Pittsburgh School of Medicine, 450 Technology Drive,
Pittsburgh, PA 15219, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 4697)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 4697)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Plasmid
76C, 87-94 (2014)"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(23-OCT-2014) Microbiology and Molecular Genetics, University of
Pittsburgh School of Medicine, 450 Technology Drive, Pittsburgh, PA
15219, USA"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..4697
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
CDS complement(29..652)
/codon_start=1
/label=TetR
/note="tetracycline repressor TetR"
/translation="MMSRLDKSKVINSALELLNEVGIEGLKTRKLAQKLGVEQPTLYWH
VKNKRALLDALAIEMLDRHHTHFCPLEGESWQDFLRNNAKSFRCALLSHRDGAKVHLGT
RPTEKQYETLENQLAFLCQQGFSLENALYALSAVGHFTLGCVLEDQEHQVAKEERETPT
TDSMPALLRQAIELFEHQGAEPAFLFGLELIICGLEKQLKCESGS"
promoter 668..723
/label=tetR/tetA promoters
/note="overlapping promoters for bacterial tetR and tetA"
primer_bind 759..775
/label=SK primer
/note="common sequencing primer, one of multiple similar
variants"
terminator 1042..1128
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 1220..1247
/label=rrnB T2 terminator
/note="transcription terminator T2 from the E. coli rrnB
gene"
promoter 1266..1357
/label=AmpR promoter
CDS 1358..2215
/codon_start=1
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
/translation="MSIQHFRVALIPFFAAFCLPVFAHPETLVKVKDAEDQLGARVGYI
ELDLNSGKILESFRPEERFPMMSTFKVLLCGAVLSRVDAGQEQLGRRIHYSQNDLVEYS
PVTEKHLTDGMTVRELCSAAITMSDNTAANLLLTTIGGPKELTAFLHNMGDHVTRLDRW
EPELNEAIPNDERDTTMPAAMATTLRKLLTGELLTLASRQQLIDWMEADKVAGPLLRSA
LPAGWFIADKSGAGERGSRGIIAALGPDGKPSRIVVIYTTGSQATMDERNRQIAEIGAS
LIKHW"
rep_origin 2260..2715
/label=f1 ori
/note="f1 bacteriophage origin of replication; arrow
indicates direction of (+) strand synthesis"
rep_origin 2826..3414
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
misc_feature complement(3600..3740)
/label=bom
/note="basis of mobility region from pBR322"
CDS complement(4131..4355)
/codon_start=1
/gene="sok"
/product="plasmid addiction system protein"
/label=sok
/protein_id="AJA39865.1"
/translation="MWTRHRDASWWLMKINLLRGYLLSATQHGNKPPSRHEAESLKRRA
HHSPYTCTLTTLTFPENNPLIQTVHGKSV"
gene complement(4131..4355)
/gene="sok"
/label=sok
CDS 4399..4557
/codon_start=1
/gene="hok"
/product="plasmid addiction system protein"
/label=hok
/protein_id="AJA39864.1"
/translation="MKLPRSSLVWCVLIVCLTLLIFTYLTRKSLCEIRYRDGHREVAAF
MAYESGK"
gene 4399..4557
/gene="hok"
/label=hok