我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- DH6-78
- 载体抗性:
- Tetracycline
- 载体长度:
- 5007 bp
- 载体类型:
- Cloning vector
- 复制子:
- pSC101 ori
- 载体来源:
- Huang DC, Holtz WJ, Maharbiz MM.
DH6-78 载体载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
DH6-78 载体载体序列
LOCUS 40924_630 5007 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Cloning vector DH6-78, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 5007)
AUTHORS Huang DC, Holtz WJ, Maharbiz MM.
TITLE A genetic bistable switch utilizing nonlinear protein degradation
JOURNAL J Biol Eng 6 (1), 9 (2012)
PUBMED 22776405
REFERENCE 2 (bases 1 to 5007)
AUTHORS Huang DC, Holtz WJ, Maharbiz MM.
TITLE Direct Submission
JOURNAL Submitted (10-JUN-2012) Electrical Engineering and Computer
Sciences, University of California, Berkeley, 656 Sutardja Dai Hall,
Berkeley, CA 94720, USA
REFERENCE 3 (bases 1 to 5007)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 5007)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "J Biol
Eng"; date: "2012"; volume: "6"; issue: "1"; pages: "9"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(10-JUN-2012) Electrical Engineering and Computer Sciences,
University of California, Berkeley, 656 Sutardja Dai Hall, Berkeley,
CA 94720, USA"
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
COMMENT ##Assembly-Data-START##
Assembly Method :: GENtle v. 1.9.4
Sequencing Technology :: Sanger dideoxy sequencing
##Assembly-Data-END##
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..5007
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
regulatory 1..82
/label=pRM
/note="pRM"
/regulatory_class="promoter"
misc_feature 9..26
/label=oR1
/note="oR1"
misc_feature 33..50
/label=oR2
/note="oR2"
misc_feature 59..65
/label=oR3mut
/note="oR3mut"
5'UTR 89..123
CDS 124..834
/label=lambda repressor
/note="phage lambda repressor"
5'UTR 847..887
CDS 888..1508
/label=TetR
/note="tetracycline repressor TetR"
CDS 1509..1541
/label=ssrA tag (LVA)
/note="C-terminal peptide that mediates degradation in
bacteria through the ClpXP and ClpAP proteases (McGinness
et al., 2006)"
terminator 1580..1651
/label=rrnB T1 terminator
/note="transcription terminator T1 from the E. coli rrnB
gene"
terminator 1667..1694
/label=T7Te terminator
/note="phage T7 early transcription terminator"
CDS complement(2228..3175)
/label=Rep101
/note="RepA protein needed for replication with the pSC101
origin"
rep_origin complement(3223..3445)
/direction=LEFT
/label=pSC101 ori
/note="low-copy replication origin that requires the Rep101
protein"
terminator complement(3937..4031)
/label=lambda t0 terminator
/note="transcription terminator from phage lambda"
CDS complement(4065..4856)
/label=NeoR/KanR
/note="aminoglycoside phosphotransferase"