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pLXSN-HXY-TCR 载体 (V013994)

我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来，主要是为了方便研究工作，其中一小部分质粒进行了质量控制，可供科学家使用。

所有的产品都严格仅供科学研究使用，不能应用于临床试验，包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。

确保质粒的关键元件正确，但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列，可能与测序结果不一致，请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序，本页面一般会提供下载)

开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%，则将其视为正确。

由于科学研究是在探索未知，具有很大的不确定性，在任何情况下，我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。

载体名称:
pLXSN-HXY-TCR
载体抗性:
Ampicillin
载体长度:
7676 bp
载体类型:
Protein expression
复制子:
ori
宿主:
Mammalian cells, Retrovirus
筛选标记:
Neo/G418
启动子:
SV40
感受态:
Stbl3
培养温度:
37℃

pLXSN-HXY-TCR 载体图谱

pLXSN-HXY-TCR7676 bp30060090012001500180021002400270030003300360039004200450048005100540057006000630066006900720075005' LTRMMLV Psigag (truncated)T cell receptor beta variable 11-2P2AT cell receptor alpha variable 17T-cell receptor alpha chain constantSV40 promoterNeoR/KanRLTRbomoriAmpRAmpR promoter

质粒操作方法

1. 发货形式：质粒干粉(常温运输，存于-20度，请务必先转化提质粒后使用)

2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min，再加入20μl ddH2O溶解质粒;（质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大，这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致，因此建议先转化提质粒后再使用）

3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min，加入2μl质粒，再冰浴30min后，42℃热激60s，不要搅动，再冰浴2min；

4. 加入900μl无抗的LB液体培养基，180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);

5. 6000rpm离心5min，仅留100μl上清液重悬细菌沉淀，并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;

6. 将平板倒置37℃培养14h，如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化；没有菌落则加入10μl质粒转化；建议不要直接转表达感受态， 要先转克隆感受态，重提质粒后再导入表达感受态);

7. 挑取单菌落至LB液体培养基中，加入对应抗生素，220rpm震荡培养14h，根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。

pLXSN-HXY-TCR 载体序列

LOCUS       V013994                 7676 bp    DNA     circular SYN 01-JAN-1980
DEFINITION  Exported.
ACCESSION   V013994
VERSION     V013994
KEYWORDS    .
SOURCE      synthetic DNA construct
  ORGANISM  synthetic DNA construct
            .
REFERENCE   1  (bases 1 to 7676)
  AUTHORS   .
  TITLE     Direct Submission
FEATURES             Location/Qualifiers
     source          1..7676
                     /mol_type="other DNA"
                     /organism="synthetic DNA construct"
     LTR             2..589
                     /label="5' LTR"
                     /note="long terminal repeat from Moloney murine sarcoma
                     virus"
     misc_feature    652..851
                     /label="MMLV Psi"
                     /note="packaging signal of Moloney murine leukemia virus
                     (MMLV)"
     CDS             1052..1468
                     /label="gag (truncated)"
                     /note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag
                     gene lacking the start codon"
     CDS             1482..1826
                     /gene="TRBV11-2"
                     /label="T cell receptor beta variable 11-2"
                     /note="T cell receptor beta variable 11-2 from Homo
                     sapiens. Accession#: A0A584"
     CDS             2421..2477
                     /label="P2A"
                     /note="2A peptide from porcine teschovirus-1 polyprotein"
     CDS             2478..2813
                     /gene="TRAV17"
                     /label="T cell receptor alpha variable 17"
                     /note="T cell receptor alpha variable 17 from Homo sapiens.
                     Accession#: A0A0B4J275"
     CDS             2877..3284
                     /gene="Trac"
                     /label="T-cell receptor alpha chain constant"
                     /note="T-cell receptor alpha chain constant from Mus
                     musculus. Accession#: P01849"
     promoter        3305..3634
                     /label="SV40 promoter"
                     /note="SV40 enhancer and early promoter"
     CDS             3694..4485
                     /label="NeoR/KanR"
                     /note="aminoglycoside phosphotransferase"
     LTR             4548..5141
                     /label="LTR"
                     /note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia
                     virus"
     misc_feature    5352..5492
                     /label="bom"
                     /note="basis of mobility region from pBR322"
     rep_origin      complement(5678..6266)
                     /direction=LEFT
                     /label="ori"
                     /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
                     replication"
     CDS             complement(6440..7297)
                     /label="AmpR"
                     /note="beta-lactamase"
     promoter        complement(7298..7402)
                     /label="AmpR promoter"