我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pLXSN-HXY-TCR
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 7676 bp
- 载体类型:
- Protein expression
- 复制子:
- ori
- 宿主:
- Mammalian cells, Retrovirus
- 筛选标记:
- Neo/G418
- 启动子:
- SV40
- 感受态:
- Stbl3
- 培养温度:
- 37℃
pLXSN-HXY-TCR 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pLXSN-HXY-TCR 载体序列
LOCUS V013994 7676 bp DNA circular SYN 01-JAN-1980 DEFINITION Exported. ACCESSION V013994 VERSION V013994 KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct . REFERENCE 1 (bases 1 to 7676) AUTHORS . TITLE Direct Submission FEATURES Location/Qualifiers source 1..7676 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" LTR 2..589 /label="5' LTR" /note="long terminal repeat from Moloney murine sarcoma virus" misc_feature 652..851 /label="MMLV Psi" /note="packaging signal of Moloney murine leukemia virus (MMLV)" CDS 1052..1468 /label="gag (truncated)" /note="truncated Moloney murine leukemia virus (MMLV) gag gene lacking the start codon" CDS 1482..1826 /gene="TRBV11-2" /label="T cell receptor beta variable 11-2" /note="T cell receptor beta variable 11-2 from Homo sapiens. Accession#: A0A584" CDS 2421..2477 /label="P2A" /note="2A peptide from porcine teschovirus-1 polyprotein" CDS 2478..2813 /gene="TRAV17" /label="T cell receptor alpha variable 17" /note="T cell receptor alpha variable 17 from Homo sapiens. Accession#: A0A0B4J275" CDS 2877..3284 /gene="Trac" /label="T-cell receptor alpha chain constant" /note="T-cell receptor alpha chain constant from Mus musculus. Accession#: P01849" promoter 3305..3634 /label="SV40 promoter" /note="SV40 enhancer and early promoter" CDS 3694..4485 /label="NeoR/KanR" /note="aminoglycoside phosphotransferase" LTR 4548..5141 /label="LTR" /note="long terminal repeat from Moloney murine leukemia virus" misc_feature 5352..5492 /label="bom" /note="basis of mobility region from pBR322" rep_origin complement(5678..6266) /direction=LEFT /label="ori" /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(6440..7297) /label="AmpR" /note="beta-lactamase" promoter complement(7298..7402) /label="AmpR promoter"