我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- Ganesh-R1
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 11450 bp
- 载体类型:
- Reporter vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Swanson CI, Hinrichs T, Johnson LA, Zhao Y, Barolo S.
- 启动子:
- lac UV5
Ganesh-R1 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
Ganesh-R1 载体序列
LOCUS 40924_1014 11450 bp DNA circular SYN 17-DEC-2018
DEFINITION Reporter vector Ganesh-R1, complete sequence.
ACCESSION .
VERSION .
KEYWORDS .
SOURCE synthetic DNA construct
ORGANISM synthetic DNA construct
REFERENCE 1 (bases 1 to 11450)
AUTHORS Swanson CI, Hinrichs T, Johnson LA, Zhao Y, Barolo S.
TITLE A directional recombination cloning system for restriction- and
ligation-free construction of GFP, DsRed, and lacZ transgenic
Drosophila reporters
JOURNAL Gene 408 (1-2), 180-186 (2008)
PUBMED 18077106
REFERENCE 2 (bases 1 to 11450)
AUTHORS Rogers CI, Hinrichs T, Johnson LA, Zhao Y, Barolo S.
TITLE Direct Submission
JOURNAL
REFERENCE 3 (bases 1 to 11450)
TITLE Direct Submission
REFERENCE 4 (bases 1 to 11450)
AUTHORS .
TITLE Direct Submission
COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Gene 408
(1-2), 180-186 (2008)"
COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted
(02-FEB-2007) Cell "
COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article"
FEATURES Location/Qualifiers
source 1..11450
/mol_type="other DNA"
/organism="synthetic DNA construct"
misc_feature complement(1..233)
/label=P element 3' end
/note="P element 3' end"
gene 242..4247
/gene="white"
/allele="+mC"
/label=white
protein_bind 4255..4379
/label=attR1
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
promoter 4404..4434
/label=lac UV5 promoter
/note="E. coli lac promoter with an 'up' mutation"
CDS 4488..5144
/label=CmR
/note="chloramphenicol acetyltransferase"
CDS 5489..5791
/label=ccdB
/note="CcdB, a bacterial toxin that poisons DNA gyrase"
protein_bind complement(5835..5959)
/label=attR2
/note="recombination site for the Gateway(R) LR reaction"
misc_feature 5965..6712
/label=spacer sequence includes partial KanR gene
/note="spacer sequence includes partial KanR gene"
regulatory 6713..6846
/label=Drosophila melanogaster Hsp70 minimal promoter
/note="Drosophila melanogaster Hsp70 minimal promoter"
/regulatory_class="promoter"
CDS 6920..7594
/label=DsRed-Express
/note="rapidly maturing tetrameric variant of DsRed
fluorescent protein (Bevis and Glick, 2002)"
misc_feature 7598..7714
/gene="DsRed.T4-NLS-SV40t"
/label=Drosophila melanogaster tra gene NLS
/note="Drosophila melanogaster tra gene NLS"
polyA_signal 7852..7986
/label=SV40 poly(A) signal
/note="SV40 polyadenylation signal"
misc_feature complement(8105..8690)
/label=P element 5' end
rep_origin complement(8925..9513)
/direction=LEFT
/label=ori
/note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of
replication"
CDS complement(9687..10544)
/label=AmpR
/note="beta-lactamase"
promoter complement(10545..10649)
/label=AmpR promoter