我们所展示的质粒图谱主要是从文献和开放数据库中收集而来,主要是为了方便研究工作,其中一小部分质粒进行了质量控制,可供科学家使用。
所有的产品都严格仅供科学研究使用,不能应用于临床试验,包括人体摄入、注射或外用的药理学用途。
确保质粒的关键元件正确,但是我们并不能保证实验结果。页面展示的图谱序列为理论序列,可能与测序结果不一致,请自行比对后确定是否满足要求。(如果测过序,本页面一般会提供下载)
开放数据库中的大多数载体序列都没有被完全测序。如果实际序列与参考序列的相似度超过99%,则将其视为正确。
由于科学研究是在探索未知,具有很大的不确定性,在任何情况下,我们都不承担超出质粒本身的额外经济损失或责任。
- 载体名称:
- pFA-HAH1-MAL2prom
- 载体抗性:
- Ampicillin
- 载体长度:
- 6668 bp
- 载体类型:
- Functional Analysis vector
- 复制子:
- ori
- 载体来源:
- Paul S, Ganesan K.
pFA-HAH1-MAL2prom 载体图谱
质粒操作方法
1. 发货形式:质粒干粉(常温运输,存于-20度,请务必先转化提质粒后使用)
2. 收到质粒干粉后请先5000rpm离心1min,再加入20μl ddH2O溶解质粒;(质粒复测的浓度有时候与标称值差距较大,这可能是因为冻干质粒在管中的位置、复溶效率、测量偏差以及管壁的吸附导致,因此建议先转化提质粒后再使用)
3. 取1支100μl 感受态于冰上解冻10min,加入2μl质粒,再冰浴30min后,42℃热激60s,不要搅动,再冰浴2min;
4. 加入900μl无抗的LB液体培养基,180rpm震荡37℃培养45min (30℃培养1-1.5小时);
5. 6000rpm离心5min,仅留100μl上清液重悬细菌沉淀,并涂布至目标质粒抗性的LB平板上;
6. 将平板倒置37℃培养14h,如果要求是30℃则培养20h; (菌落过多则将质粒稀释后再转化;没有菌落则加入10μl质粒转化;建议不要直接转表达感受态, 要先转克隆感受态,重提质粒后再导入表达感受态);
7. 挑取单菌落至LB液体培养基中,加入对应抗生素,220rpm震荡培养14h,根据实验需要和质粒提取试剂盒说明书提取质粒。
pFA-HAH1-MAL2prom 载体序列
LOCUS 40924_19096 6668 bp DNA circular SYN 18-DEC-2018 DEFINITION Functional Analysis vector pFA-HAH1-MAL2prom, complete sequence. ACCESSION . VERSION . KEYWORDS . SOURCE synthetic DNA construct ORGANISM synthetic DNA construct REFERENCE 1 (bases 1 to 6668) AUTHORS Paul S, Ganesan K. TITLE Single-Transformation Gene Function Test by Conditional Expression of Both Alleles of Candida albicans Genes JOURNAL Unpublished REFERENCE 2 (bases 1 to 6668) AUTHORS Paul S, Ganesan K. TITLE Direct Submission JOURNAL Submitted (01-NOV-2010) Institute of Microbial Technology, Sector 39-A, Chandigarh, UT 160036, India REFERENCE 3 (bases 1 to 6668) TITLE Direct Submission REFERENCE 4 (bases 1 to 6668) AUTHORS . TITLE Direct Submission COMMENT SGRef: number: 1; type: "Journal Article"; journalName: "Unpublished" COMMENT SGRef: number: 2; type: "Journal Article"; journalName: "Submitted (01-NOV-2010) Institute of Microbial Technology, Sector 39-A, Chandigarh, UT 160036, India" COMMENT SGRef: number: 3; type: "Journal Article" FEATURES Location/Qualifiers source 1..6668 /mol_type="other DNA" /organism="synthetic DNA construct" gene 47..915 /gene="HIS1" /label=HIS1 repeat_region 562..915 gene 921..2871 /gene="ARG4" /label=ARG4 /note="derived from Candida albicans ARG4" CDS 1378..2784 /codon_start=1 /gene="ARG4" /product="argininosuccinate lyase" /EC_number="4.3.2.1" /label=ARG4 /protein_id="AEQ75401.1" /translation="MSQQQDKQPSENKLWGGRFTGATDPLMDLYNASLPYDKVMYDADL TGTKVYTQGLNKLGLITTEELNLIHQGLEQIRQEWHDNKFIIKAGDEDIHTANERRLGE IIGKNISGKVHTGRSRNDQVATDMRIFVRESLLNLSKILHQFITAILERAHKEIDVLMP GYTHLQKAQPIRWAHWLSSYATYFTEDYKRLQEIITRVNQSPLGSGALAGHPYGIDREF LAKGLGFDGVIGNSLTAVSDRDFVVESLFWSTLFMNHISRFSEDLIIYSSGEFGFIKLA DAYSTGSSLMPQKKNPDSLELLRGKSGRVFGQLSGFLMSIKSIPSTYNKDMQEDKEPLF DALTTVEHSILIATGVISTLLIDKQNMEKALTMDMLATDLADYLVRKGVPFRETHHISG ECVRKAEEEKLSGIDQLSFEQFQQIDSRFEKDVMETFDFEASVERRDALGGTAKSAVLK QLENLKSILS" gene 2876..3729 /gene="HIS1" /label=HIS1 repeat_region 2876..3229 regulatory 3734..4269 /label=MAL2 promoter from Candida albicans /note="MAL2 promoter from Candida albicans" /regulatory_class="promoter" promoter complement(4306..4324) /label=T7 promoter /note="promoter for bacteriophage T7 RNA polymerase" rep_origin complement(4582..5170) /direction=LEFT /label=ori /note="high-copy-number ColE1/pMB1/pBR322/pUC origin of replication" CDS complement(5344..6201) /label=AmpR /note="beta-lactamase" promoter complement(6202..6306) /label=AmpR promoter promoter 6652..6668 /label=SP6 promoter /note="promoter for bacteriophage SP6 RNA polymerase"