1. 将杂文瘤置于一个盛有完全DMEM-10培养基的175 cm
2
组织培养瓶中,置37 ℃CO
2
培养箱中,直至生长旺盛适于分传。
2. 按1:10的比例将细胞分传到一个新的175 cm 2 的培养瓶中,加入完全DMEM-10培养液到总液量为100 ml,并置CO 2 培养箱中直至细胞过度生长,此时溶液变酸(变黄色),细胞死亡(约5天)。
3. 将培养瓶中的内容物转移到无菌的50 ml 的锥形离心管中,室温下1 500 g 离心10 min,收集上清,弃沉淀。
4. 用ELISA法或用流式细胞仪检测MAb上清的滴度。
5. 将上清无菌保存,在4℃时通常可稳定地存放数周至数月;在-20℃时可存放数月至数年;-70℃时可永久保存。分装成数份冻存,尽量避免反复冻融。