1. 将10 mg 的血蓝蛋白溶于2 ml pH10的硼酸缓冲液中,置于15 ml 的玻璃试管中,温和振摇。
2. 加10 μmol 的合成肽。
3. 缓慢加入1 ml 的0.3%戊二醛溶液,于室温下振摇。
4. 使其反应2 h(溶液将变成黄色)。
5. 加0.25 ml 的1 mol/l 甘氨酸以封闭未反应的戊二醛,使其反应30 min。
6. 偶联物对3 L 硼酸缓冲液在4℃透析过夜。
7. 更换硼酸缓冲液后继续透析4 h, 贮存于4℃。
7. 更换硼酸缓冲液后继续透析4 h, 贮存于4℃。