1.  抗原包被

取洁净的聚苯乙烯微量反应板，于每孔内加伤寒抗原0.1毫升（用包被缓冲液稀释，蛋白含量10微克/毫升），置37℃1小时，弃抗原液，用洗涤液3次每次3分钟。

2.  加待测血清

于每孔内分别加不同稀释度（如1：5，1：10，1：20…1：80）的待测血清，PBS空白对照，阴性对照血清，阳性对照血清各0.1毫升。置37℃30分钟，洗涤3次。

3.  加酶联A蛋白

于每孔加酶联A蛋白各0.1毫升，置37℃20分钟，洗涤3次。

4.  加临时配制的底物溶液各0.1毫升，置暗处15分钟。加2M碳酸1滴终止反应。

5.  结果判断：（肉眼判断）

若颜色于阴性对照相同则为阴性，若较阴性对照深则为阳性，根据颜色深浅以（+）表示。