1. 细菌浓悬液用盐水经2500转/分，20分钟离心洗涤一次。

2. 将沉淀的菌混匀于蒸馏水中，放66℃水浴，然后滴加等量的90%热酚溶液（预热至66℃），边加边摇，而后在66℃水浴中搅拌25分钟

3. 在水浴中冷却，于4℃冰箱过夜

4. 以2000转/分离心15分钟

5. 将上层水溶液吸到另一试管中

6. 剩下的酚层及残渣组分可再加上述同量水在热水浴中搅拌30分钟，冷却，离心，取上层水溶液。将两次提的水溶液混合，置透析袋中于生理盐水中透析2天，其间换几次盐水，以除去酚。

7. 透析后的水溶液层经浓缩（如用聚乙二醇在透析袋外层涂抹以除去水分）。即成粗制脂多糖，于冰箱内保存备用。