免疫荧光技术-直接法

直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧 光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在 部位。
1.  标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;

2.  加荧光素标记的抗体,湿盒内37 ℃孵育50 分钟;


3.  PBS洗涤3×3 分钟;

4.  0.1 %伊文氏兰复染;

5.  PBS洗3 次,蒸馏水洗2 次,每次3 分钟,以除去NaCl结晶;

6.  缓冲甘油封片,镜检。

注意事项
直接法比较简单,特异性也较高,但每种荧光抗体只能检测一种相应的抗原,应用 范围较窄,敏感性也较低。

2014-12-12