直接法是以荧光素标记的抗体直接与标本内的抗原反应,形成抗原—荧
光素标记抗体复合物。根据荧光的分布位置及强度,确定相应抗原的存在与否及其所在
部位。
1. 标本经固定后,PBS洗涤3×3 分钟;
3. PBS洗涤3×3 分钟;
4. 0.1 %伊文氏兰复染;
5. PBS洗3 次,蒸馏水洗2 次,每次3 分钟,以除去NaCl结晶;
6. 缓冲甘油封片,镜检。
2. 加荧光素标记的抗体,湿盒内37 ℃孵育50 分钟;
3. PBS洗涤3×3 分钟;
4. 0.1 %伊文氏兰复染;
5. PBS洗3 次,蒸馏水洗2 次,每次3 分钟,以除去NaCl结晶;
6. 缓冲甘油封片,镜检。
注意事项
直接法比较简单,特异性也较高,但每种荧光抗体只能检测一种相应的抗原,应用
范围较窄,敏感性也较低。