基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合,再用荧光素标记的二
抗与特异性抗体相结合,形成抗原—特异性抗体—标记荧光抗体的复合物。因为在复合物
上带有比直接法更多的荧光标记物,所以比直接法更敏感。
1. 标本固定后,PBS洗涤3×3 分钟;
3. PBS洗3×3 分钟;
4. 滴加荧光标记二抗37 ℃,40 分钟;
5. PBS洗3×3 分钟;
6. 0.1 %伊文氏兰复染;
7. PBS洗3×3 分钟;
8. 缓冲甘油封片,镜检。
2. 滴加一抗,37 ℃40 分钟或4 ℃过夜;
3. PBS洗3×3 分钟;
4. 滴加荧光标记二抗37 ℃,40 分钟;
5. PBS洗3×3 分钟;
6. 0.1 %伊文氏兰复染;
7. PBS洗3×3 分钟;
8. 缓冲甘油封片,镜检。