免疫荧光技术-间接法

基本原理是先用特异性抗体与细胞内相应抗原结合,再用荧光素标记的二 抗与特异性抗体相结合,形成抗原—特异性抗体—标记荧光抗体的复合物。因为在复合物 上带有比直接法更多的荧光标记物,所以比直接法更敏感。
1.  标本固定后,PBS洗涤3×3 分钟;

2.  滴加一抗,37 ℃40 分钟或4 ℃过夜;


3.  PBS洗3×3 分钟;

4.  滴加荧光标记二抗37 ℃,40 分钟;

5.  PBS洗3×3 分钟;

6.  0.1 %伊文氏兰复染;

7.  PBS洗3×3 分钟;

8.  缓冲甘油封片,镜检。

2014-12-12