吞噬功能实验-人巨噬细胞吞噬功能测定

一、材料准备

1.  斑蟊浸液制备:斑蟊以95%乙醇溶液制成10%酊剂,室温下浸泡2周后使用。

2.  人巨噬细胞的获取:取滤纸片蘸斑蟊酊,置于一侧前臂皮肤上,在滤纸片上盖一塑料片,再以清洁纱布固定4~5小时,取下滤纸片,再用塑料瓶盖将局部罩上,以防形成的水疱破裂,48小时即可形成完整的水疱。
二、实验步骤
取水疱渗出液0.5 ml,加5%鸡红细胞悬液0.01 ml
混匀,置37℃水浴30分钟(每10分钟轻轻摇晃一次)
1000 r/ min 离心5分钟,弃上清,留少许液体混匀细胞,涂片
用甲醇溶液固定后,用瑞士-姬姆萨染色,油镜观察
注意事项
1.  细胞涂片要轻,以免推破巨噬细胞。涂片不可过厚或过薄,以免影响观察结果。

2.  斑蟊酊剂皮肤炎性渗出液大多再1 ml,最多的可达6 ml,渗出液中所含巨噬细胞平均为30%~40%,最多可达80%。

3.  抽取水疱液时,将皮肤消毒后,用无菌注射器抽取,盛于无菌试管中;局部敷以无菌纱布,24小时后取下纱布。用此方法病人无痛苦及不良反应。

2014-12-12