1.  用地高辛标记的探针与切片杂交并洗片（见“”基本方案步骤1~6）。

2.  加50 μl 10 μg/ml 的羊抗地高辛抗体Fab片段于玻片上，盖以22 mm ² 大小的Parafilm 膜，置37℃温育30 min。

3.  移去Parafilm 膜，分别在4×SSC、0.1% Triton X-100/4×SSC、4×SSC中洗片，每次15 min。

4.  吸去残余4×SSC，加50 μl 地高辛信号放大溶液于玻片上，盖以22 mm ² 的Parafilm 膜，放加湿盒中。加湿盒外裹以铝箔，置37℃温育30 min。

5.  重复步骤3冼片。

6.  复染，加盖玻片并镜下观察结果（见“”基本方案步骤9~12）。