由于辐射能使空气中的氧电离成［O］，再使O2氧化生成臭氧（O3）或使水（H2O）氧化生成过氧化氢（H2O2），O3和H2O2均有杀菌作用。紫外线穿透力不大，所以，只适用于无菌室、接种箱、手术室内的空气及物体表面的灭菌。紫外线灯距照射物以不超过1.2 m 为宜。
1. 单用紫外线照射
（1）在无菌室内或在接种箱内打开紫外线灯开关，照射30分钟，将开关关闭。
（2）将牛肉膏蛋白胨平皿盖打开15分钟，然后盖上皿盖，置37℃培养24小时。共做三套。
（3）检查每个平皿上生长的菌落数。如果不超过4个，说明灭菌效果良好，否则，需延长照射时间或同时加强其他措施。
2. 化学消毒剂与紫外线照射结合使用
（1）在无菌室内，先喷洒3~5%的石炭酸溶液，再用紫外线灯照射15分钟。
（2）无菌室内的桌面、凳子用2~3%来苏尔擦洗，再打开紫外线灯照射15分钟。
（3）检查灭菌效果。
由于紫外线对眼结膜及视神经有损伤作用，对皮肤有刺激作用，所以，不能直视紫外线灯光，更不能在紫外线灯光下工作。