玻片凝集反应(slide agglutirlation)是将已知的抗体直接与未知的颗粒性抗原物质(如细菌,立克次体,钩端螺旋体等)混合,在有适当电解质存在的条件下,如两者对应便发生特异性结合而形成肉眼可见的凝集物,即为阳性:如两者不对应便无凝集物出现,即为阴性。此法属定性试验,主要用于细菌鉴定和分型等。
1. 取载玻片一张平置实验台上,用特种铅笔或记号笔划分为三格,并标明1,2,3。
2. 用1 ml 吸管吸取生理盐水1~2 滴于玻片第1 格内,另取一支吸管,吸取1:10 稀释的伤寒杆菌诊断血清1~2 滴于第2,3 格内。
3. 将接种环在酒精灯火焰上烧灼灭菌,冷却后取少许伤寒杆菌培养物与第1格内的生理盐水混合,并涂抹成均匀悬液。然后用同法取少许伤寒杆菌培养物与第2格内的诊断血清混合,并涂抹均匀。烧灼接种环,待冷却后取少许大肠杆菌培养物与第3 格内的诊断血清混合并涂抹成均匀悬液。静置数分钟后观察结果。
[结果观察]
如上述混合悬液由均匀混浊状变为澄清透明,并出现大小不等的乳白色凝集块者即为阳性;如混合物仍呈均匀混浊状则为阴性。如肉眼观察不够清楚,可将玻片置于显微镜下用低倍镜观察。
本次实验结果第2 格内应出现大小不等的乳白色凝集物(阳性),第1 ,3 格内无凝集物(阴性)
注意事项
1. 伤寒杆菌为肠道致病菌,在实验中务必严格无菌操作,遵守实验规则,用后的载玻片应立即放入盛有消毒剂的容器内,接种环必须作烧灼灭菌处理。
2. 取细菌培养物时,不宜过多,与诊断血清混合涂抹时,必须将细菌涂散,涂均匀,但不宜涂得太宽,以免很快干涸而影响结果观察。