1. 标记试管

取装有葡萄糖蛋白胨培养液的试管，根据需要将培养的细菌做好标记。

2. 接种培养

以无菌操作分别接种少量菌苔至以上相应试管中，空白对照管不接种，置37℃恒温箱中，培养24～48h。

3. 观察记录

取出以上试管，振荡2min。另取5支空试管相应标记菌名，分别加入3～5ml以上对应管中的培养液，再加入40％NaOH溶液10～20滴，并加入约0.5～1mg微量肌酸，振荡试管，以使空气中的氧溶入，置37℃恒温箱中保温15～30min后，若培养液呈红色，记录为V.P.试验阳性反应（用“＋”表示）；若不呈红色，记录为V.P.试验阴性反应（用“－”表示）。