荚膜是包围在细菌细胞外面的一层粘液性物质,其主要成分是多糖类,不易被染色,故常用衬托染色法,即将菌体和背景着色,而把不着色且透明的荚膜衬托出来。荚膜很薄,易变形,因此,制片时一般不用热固定。
1. 在载玻片一端滴一滴无菌水,取少许培养了72小时的圆褐固氮菌在水滴中制成悬液。取一滴新配好的黑色素溶液(也可用绘图墨水)与菌悬液混合,另取一块载玻片作为推片,将推片一端平整的边缘与菌悬液以30度角接触后,顺势将菌悬液推向前方,使其成匀薄的一层,风干。
2. 用纯甲醇固定1分钟。
3. 加番红液数滴于涂片上,冲去残余甲醇,并染30秒钟,以细水流适当冲洗,吸干后油镜检查,背景黑色,荚膜无色,细胞红色。