1、取新制备的一管感受态细胞。
2、取0．03 ml感受态细胞转和4 ng质粒DNA混匀，置冰浴30min
3、将 Ep管置于42 ℃水浴中热冲击2分钟，立即置于冰上1分钟。
4、在 Ep管中加70 ul LB培养基混匀，37 ℃培养30min
5、涂在含适当浓度抗生素的LB平板上。
6、37 ℃培养过夜，长出的菌斑既为阳性克隆。