2.  按甲酰胺法制备探针并用2 ml 杂交液Ⅰ稀释。

3.  滤膜在65℃杂交过夜，然后移去杂交液，用低严紧性洗膜液Ⅰ洗膜2次。

4.  用高严紧性洗膜液Ⅰ在65℃迅速洗膜5~8次。

5.  最后一次洗膜延时到20 min，洗涤后的滤膜的非特异性信号达到仅比背景高几倍的水平。