1. 培养并收集酵母菌细胞，冷冻细胞沉淀。
2. 用300 μl RNA缓冲液中重悬细胞沉淀。
3. 加1体积冷的酸洗玻璃珠（体积与约200 μl 水相等）、300 μl 的用RNA缓冲液平衡的25：24 ：1酚/氯仿/异戊醇，拧紧瓶盖，然后颠倒并上下振荡以保证珠子悬浮，在旋涡混合器上高速剧烈振荡2 min。
4. 室温下离心1 min，将200~250 μl 水（上）相转移到一个干净的离心管中。
5. 加等体积的25：24：1酚/氯仿/异戊醇，激烈振荡10 s。
4. 室温下离心1 min，将200~250 μl 水（上）相转移到一个干净的离心管中。
5. 加等体积的25：24：1酚/氯仿/异戊醇，激烈振荡10 s。
6. 重复步骤4，加3体积冰冷的无水乙醇，充分混合，于-20℃放置30 min 以上，或在干冰上放置5 min。
7. 于4℃离心2 min，吸出或倒掉上清，用冰冷的70%乙醇洗涤沉淀。
8. 于4℃离心1 min，吸出或倒掉上清，干燥沉淀。沉淀用50 μl 水重悬，用分光光度法测定A 260 及A 280 以确定浓度，于-70℃贮存RNA。
7. 于4℃离心2 min，吸出或倒掉上清，用冰冷的70%乙醇洗涤沉淀。
8. 于4℃离心1 min，吸出或倒掉上清，干燥沉淀。沉淀用50 μl 水重悬，用分光光度法测定A 260 及A 280 以确定浓度，于-70℃贮存RNA。